Estudo de inibicao do complexo nadph oxidase por apocinina em celulas fagociticas: papel da mieloperoxidase.

Resumo

NADPH oxidase é um complexo multienzimático que uma vez ativado resulta na produção de ânion superóxido, o qual é o precursor de diversas espécies reativas de oxigênio (EROs) como peróxido de hidrogênio, radical hidroxila, oxigênio singlete, peroxinitrito e, através da ação catalítica da mieloperoxidase (MPO), ao ácido hipocloroso. A produção excessiva de EROs é prejudicial aos tecidos adjacentes e é a base de diversas doenças inflamatórias. Apocinina é um metoxi-catecol utilizado como inibidor do complexo NADPH oxidase em muitos modelos experimentais envolvendo células fagociticas e um protótipo promissor para o desenvolvimento de uma nova série de drogas anti-inflamatórias não esteroidais. A apocinina é uma pró-droga que é convertida, por oxidação mediada por peroxidase, em um dímero que apresenta maior capacidade anti-inflamatória que a apocinina em si. Em neutrófilos, a MPO é a responsável pela oxidação da apocinina quando essas células são ativadas. Monócitos possuem grânulos positivos para MPO, mas em menor concentração que os neutrófilos. O papel da apocinina em células não-fagocíticas é controverso, assim como a sua necessidade de oxidação pela MPO. Nosso objetivo é avaliar o papel da MPO sobre o efeito inibitório da apocinina determinando a extensão da inibição do sistema NADPH oxidase provocado pela apocinina e por seu dímero (diapocinina, que será sintetizada neste projeto) em células com diferentes concentrações de MPO. Para isso utilizaremos células HL-60 diferenciadas em neutrófilos e monócitos, e as técnicas de quimiluminescência e HPLC para determinação de superóxido. (AU)