Desenvolvimento e validação clínica de métodos moleculares para diagnóstico precoce de candidíase e aspergilose invasivas

Resumo

Os fungos são ubíquos na natureza e diversas espécies são consideradas patógenos oportunistas. Na medicina contemporânea, infecções oportunísticas por fungos tornaram-se problema de saúde pública relevante particularmente em cenários como: pacientes de unidade de terapia intensiva, pacientes submetidos a transplante de órgãos e pacientes com câncer. Nestas populações, Candida sp. e Aspergillus sp. respondem pela grande maioria das infecções fúngicas invasivas e constituem especial desafio para os clínicos. Trata-se de infecções que, muitas vezes, são diagnosticadas tardiamente e associadas a alta letalidade. É fundamental o desenvolvimento de novos recursos diagnósticos que tornem possível o reconhecimento precoce destas complicações, particularmente em pacientes imunocomprometidos, para que a terapia direcionada possa ser administrada o mais rápido possível. Portanto, este projeto tem como objetivo geral, desenvolver protocolos para o diagnóstico molecular de Candida sp. e Aspergillus sp. nos seguintes materiais biológicos: (i) sangue, em que será focada a pesquisa de Candida spp; (ii) amostras de trato respiratório, onde o foco será Aspergillus spp.; e (iii) amostras de tecido, com foco em Candida spp. e Aspergillus spp. O material biológico será coletado de pacientes de risco, bem como de pacientes com diagnóstico estabelecido por métodos convencionais (exame histopatológico, cultura ou hemocultura positivos para fungos). Sendo assim, os objetivos específicos deste projeto são: 1. Identificação rápida de leveduras patogênicas em amostras de hemocultura positivas através de amplificação de DNA fúngico utilizando a metodologia de PCR em tempo real, com a identificação das principais espécies de Candida patogênicas. 2. Identificação rápida de infecção fúngica em amostras de sangue total, de trato respiratório e de biópsia de tecido, utilizando amplificação e sequenciamento de DNA fúngico presente na amostra ou aplicando a metodologia de PCR quantitativo (qPCR) para diagnóstico de aspergilose invasiva. No Brasil existem poucos centros que utilizam diagnóstico molecular na rotina. Somos laboratório de referência na micologia médica: temos conhecimento na área de identificação molecular de fungos patogênicos, testes de susceptibilidade a antifúngicos, e equipe multidisciplinar para a seleção de pacientes portadores de infecções fúngicas, incluindo aqueles susceptíveis a estes tipos de infecções, candidatos ao monitoramento destas doenças.