Avaliação in vitro dos efeitos da laserterapia de baixa intensidade sobre cultura de osteoblastos, fibroblastos e queratinócitos submetidos ao tratamento com ácido zoledrônico

Resumo

A osteonecrose bucal tem sido associada à terapia com bisfosfonatos. Estudos têm relatado que esses medicamentos podem causar efeitos citopaticos no tecido ósseo e também nos tecidos adjacentes - conjuntivo e/ou epitélio. Trabalhos clínicos atuais apresentaram resultados positivos da laserterapia de baixa intensidade no tratamento desta alteração, sugerindo uma biomodulação nos tecidos envolvidos. Portanto, o presente projeto de pesquisa terá como objetivos avaliar: 1) os efeitos do aminobisfosfonato Ácido Zoledrônico (Zometa® - Novartis, Brasil) sobre cultura de células osteoblásticas, fibroblásticas e queratinocitos, e 2) a ação da laserterapia de baixa intensidade sobre estas mesmas células tratadas com Zometa®. Para o primeiro experimento, as três linhagens celulares serão cultivadas (30.000 cells/cm2) em meio de cultura (DMEM) com 10% de soro fetal bovino (SBF). Após 24 horas, o DMEM será substituído pela solução de Zometa® (5μM/mL) diluído em DMEM livre de SFB. Após 48 horas, as células serão avaliadas quanto ao metabolismo celular, produção de proteína total, síntese de fosfatase alcalina e morfologia celular. No segundo experimento, as células tratadas com Zometa® receberão 3 irradiações com parâmetros específicos (780±3 nm, 40 mW, 3 J/cm2) com intervalos de 24 horas, estabelecendo-se assim os seguintes grupos experimentais: G1: DMEM (controle); G2: DMEM+Zometa®; G3: DMEM+Laserterapia; e G4: DMEM+Zometa®+Laserterapia. A seguir, os grupos serão avaliados tal como descrito anteriormente, associado à expressão gênica VEGF, bFGF, Col-1, RANK, OPG, KGF e EGF (RT-PCR). Os dados obtidos serão analisados quanto à sua distribuição de normalidade, sendo que caso essa condição seja respeitada, o teste de escolha será o ANOVA a dois critérios, completados pelo teste de Tukey. Caso contrário, os testes estatísticos selecionados serão de Kruskal-Wallis complementado por Mann-Whitney ao nível de significância de 5%. (AU)