SEQUENCIAMENTO E CARACTERIZAÇÃO DO GENE CODIFICADOR DA HEPCIDINA EM ASININOS (Equus asinus)

Resumo

Ferramentas moleculares têm se tornado cada vez mais rápidas e fáceis de serem utilizadas nos últimos anos, fazendo com que o sequenciamento de genes possa fazer parte de pesquisas sem dispensar grandes recursos financeiros e de tempo. A determinação da sequência de determinados genes tem, posteriormente, possibilitado a compreensão de mecanismos de expressão e a explicação de processos fisiológicos. Recentemente a compreensão de parte do metabolismo de ferro, que está ligado a diferentes processos fisiológicos considerados vitais, sofreu grande evolução com o sequenciamento de um peptídeo denominado hepcidina. Esta caracterização permitiu aprofundar os conhecimentos sobre a anemia ligada a inflamação, assim como, parte do controle do ferro durante processos infecciosos, diminuindo a disponibilidade deste elemento para os microorganismos. Este estudo tem como objetivo sequenciar e caracterizar o gene codificador da hepcidina em asininos (Equus asinus). Para isto, será extraído RNA, de amostras hepáticas colhidas de quatro asininos para confecção do cDNA. O gene da hepcidina será amplificado com o uso de "primers" homólogos as outras hepcidina de mamíferos e com o cDNA gerado anteriormente como "template". Em seguida, ocorrerão as etapas de sequenciamento e análise da estrutura gênica. O desenvolvimento do projeto permitirá ao aluno aprender e aperfeiçoar técnicas de biologia molecular, manejo de animais de grande porte, técnica de biópsia hepática, extração e conservação de RNA, confecção de cDNA, determinação da concentração e pureza de ácidos nucléicos, amplificação de material genético, eletroforese, interpretação de sequenciamentos. Permitirá também a convivência com alunos de iniciação científica e de pós-graduação, e a sua integração aos projetos de pesquisa realizados no Laboratório de Biologia Molecular da Clínica Veterinária.