Estudo in vitro da Influência de Estímulos Biomecânicos no Comportamento de Células-Tronco Mesenquimais sobre Arcabouço Biorreabsorvível

Resumo

O grande desafio da engenharia de tecidos está em produzir e desenvolver dispositivos tridimensionais que sirvam como arcabouço para crescimento de moléculas, células, tecidos ou órgãos, visando substituir ou auxiliar a função de partes do corpo defeituosas ou danificadas. Polímeros da classe dos poli(a-hidróxi ácidos) possuem alto potencial para essas aplicações devido as suas características de biorreabsorção e biocompatibilidade. O objetivo deste trabalho é estudar o efeito do potencial sinérgico do uso de meio condrogênico e estímulos biomecânicos em arcabouços de PLA/PLGA cultivados com células-tronco mesenquimais humanas para regeneração de menisco. Para tanto este trabalho será desenvolvido em 3 etapas: 1) Arcabouços tridimensionais serão obtidos pelo método de deposição por fusão de fibras de PLA/PLGA (60/40) e caracterizados por microscopia eletrônica de varredura (MEV), cromatografia de permeação em gel (GPC), calorimetria diferencial de varredura (DSC) e análises termogravimétricas (TGA), ensaio mecânico de compressão, analise dinâmico-mecânica (DMA) e ensaio de degradação in vitro; 2) Obtenção e caracterização de células mesenquimais humanas (hMSCs) obtidas a partir de medula óssea e 3) Estudo da diferenciação e influência do cultivo em bioreator. Após 0, 14 e 28 dias, os resultados serão analisados através de ensaios de citotoxicidade, MEV, histoquímica, imunohistoquimica, ensaio colorimétrico, microscopia confocal e reação em cadeia da polimerase em tempo real (RT-PCR), que garantem a expressão de genes de diferenciação e proteínas especificas.