Estudos de sinalização celular e mecanismos de indução da formação de celulases pelo fungo Trichoderma reesei (Hypocrea jecorina)

Resumo

O fungo filamentoso Trichoderma reesei (Hypocrea jecorina) produz um grande número de celulases e hemicelulases que podem ser usadas na degradação de componentes da biomassa com aplicação na produção de bicombustível. A transcrição da maioria dos componentes do complexo de celulases é induzida não apenas por celulose, mas também por uma variedade de dissacarídeos incluindo lactose, celobiose e soforose e antagonizado por glicose. Entretanto, nem a natureza do indutor nem as vias de sinalização celular são totalmente conhecidas. O objetivo deste projeto é entender os mecanismos de formação de celulases pelo fungo T. reesei, bem como o mecanismo de repressão e as vias de sinalização celular envolvidas nesses processos. Como estratégia, utilizaremos técnicas de genômica e proteômica. Bibliotecas de cDNA serão construídas nas diferentes condições citadas acima e seqüenciadas utilizando Seqüenciamento Massal em Paralelo (Next Generation Sequencing-NGS) e a expressão dos genes diferencialmente expressos serão validados por PCR em Tempo Real (RT-qPCR). O secretoma e a identificação de proteínas fosforiladas nas condições citadas serão analisados pela técnica de eletroforese 2-D fluorescente em gel diferencial (DIGE). Com os dados obtidos, um modelo de expressão gênica global será construído utilizando ferramentas de bioinformática o que possibilitará um melhor entendimento do comportamento da expressão gênica das enzimas celulolíticas produzidas pelo T. reesei contribuindo para sua aplicação na indústria de biocombustível. (AU)