Efeito das soluções químicas e dos meios físicos utilizados na irrigação endodôntica na dentina infectada por biofilmes orais

Resumo

O objetivo deste estudo é avaliar o efeito do hipoclorito de sódio sobre as características estruturais e a viabilidade das células microbianas no biofilme dental formado sobre dentina bovina estéril com relação à concentração do hipoclorito de sódio (1% vs 2,5%), tempo de exposição à solução irrigadora (5, 15 e 30 minutos), uso de agentes tensoativos, superfície da dentina e uso de ultrassom. Serão utilizados blocos de dentina bovina esterilizados e fixados num aparelho intrabucal palatino , que sera usado por um voluntário por um período de 72 - 96 horas para a formação do biofilme oral in situ. Transcorrido esse período, os blocos de dentina serão cuidadosamente retirados da placa palatina e lavados em placas de cultura celular com 100 µl de PBS. Os blocos serão tratados experimentalmente com hipoclorito de sódio utilizando diferentes concentrações e tempos. Apos o experimento, 500µl de tiosulfato de sódio foram utilizados para eliminar resíduos e inativar a solução de hipoclorito de sódio. As amostras serão coradas com 50 µl de uma solução de Syto8-Iodeto de propício Live/Dead technique (marcador de integridade de membrana celular) por 10 minutos para o posterior análise da vitalidade e espessura do biofilme no microscópio Confocal de Varredura a Laser. Para os experimentos que incluem o uso do ultrassom serão utilizados dentes de acrílico transparentes com canal artificial. Uma cavidade externa que comunica com o canal radicular artificial permitirá posicionar o bloco de dentina infectado para simular as condições intracanais após o uso do ultrassom.A análise estatística dos valores obtidos para cada grupo será realizada utilizando o programa "GraphPad Prism". Para o estudo da comparação entre concentração e períodos de contato da solução irrigadora com o biofilme será aplicada a análise de variância (ANOVA), seguida pelo teste de Tukey para comparações múltiplas entre eles.