Desenvolvimento de imunossensores para análise de antígenos empregando-se superfícies SERS-ativas

Resumo

Este projeto de pesquisa visa o desenvolvimento de sensores empregando anticorpos imobilizados sobre superfícies de ouro (imunossensores). A interação anticorpo-antígeno será avaliada por técnicas espectrofotométricas, principalmente por espectroscopia Raman intensificada pela superfície (do inglês, Surface Enhanced Raman Spectroscopy - SERS). O interesse em desenvolver imunossensores está relacionado com a detecção de macromoléculas, como, por exemplo, proteínas diversas, DNA, hormônios e fármacos, que podem despertar interesse do ponto de vista ambiental e/ou de saúde pública. Devido ao uso de anticorpos, os imunossensores têm demonstrado alta seletividade e sensibilidade, podendo ser empregados em métodos analíticos quase específicos para a determinação de compostos alvos. Entretanto, um dos grandes desafios para a construção de imunossensores mais sensíveis, robustos e de maior confiabilidade é a imobilização das biomoléculas sobre superfícies condutoras, em sua forma estável e com a manutenção de suas propriedades físico-químicas de reconhecimento. Especificamente com relação aos imunossensores, um dos maiores desafios corresponde à imobilização de anticorpos sobre as superfícies de Au de modo que a proteína não desnature, que interações protéicas diferentes da antígeno-anticorpo sejam minimizadas e que a ligação anticorpo-superfície não afete o sítio de ligação anticorpo-antígeno. Neste caso, a orientação da ligação dos anticorpos sobre a superfície de imobilização é de extrema relevância. A detecção de antígenos pode ser feita por diversas maneiras, utilizando-se, por exemplo, anticorpos marcados com moléculas que apresentem fluorescência ou que podem ser quimiluminescentes. Uma alternativa é detectar a interação por meio da técnica SERS (aplicada para caracterizar estruturas moleculares), de modo que o espectro obtido poderá apresentar diferenças quando o anticorpo imobilizado sobre uma superfície ativa no SERS (por exemplo, filmes de Au ou nanopartículas de Au) se ligar ao antígeno de interesse. (AU)