Producao de glicoproteinas da raiva atraves do cultivo de celulas bhk-21 em biorreatores usando sistema de expressao semliki forest virus (sfv).

Resumo

Para o controle da raiva utilizam-se estratégias profiláticas pré e pós-exposição. Estas estão baseadas em vacinas de vírus atenuado, as de primeira geração em altos riscos biológicos, as mais modernas com limitações de custos para países em desenvolvimento e processos de produção com problemas de biossegurança associados. Uma solução seria obter uma vacina de subunidade que utilize como substância farmacologicamente ativa, a glicoproteína G do vírus da raiva. Esta proteína tem demonstrado uma marcante resposta imune protetora contra o vírus da raiva em animais. Entre os hospedeiros utilizados para produzir a glicoproteína G por técnicas de ADN recombinante encontram-se: Escherichia coli, Saccharomyces cerevisiae, células de Drosophila melanogaster. Para esta última linhagem, o cultivo celular foi otimizado em biorreator tipo tanque agitado no laboratório de Engenharia Bioquímica da Escola Politécnica (USP). Recentemente, experimentos em pequena escala realizados com o sistema de expressão Semliki Forest vírus (SFV) em células renais de bebê de hamster (BHK) resultaram promissórios para a obtenção com alta produtividade da glicoproteína G. O presente projeto tem como objetivo principal estabelecer as condições ótimas para um cultivo descontínuo alimentado em biorreator tanque agitado para a obtenção da glicoproteína G usando o sistema de expressão SFV recombinante - BHK. Os resultados derivados do trabalho experimental permitirão: comparar em termos de produtividade o processo já definido com células geneticamente modificadas de Drosophila melanogaster, obter quantidades suficientes da proteína de interesse para estudos de caracterização estrutural e imunológicos bem como estabelecer uma plataforma para o escalonamento deste processo de biotransformação, caso for necessário. (AU)