Expressão e purificação de proteína viral recombinante de membrana para estudos de função

• Processo: 10/52255-4
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de janeiro de 2011
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2012
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Microbiologia - Microbiologia Aplicada
• Acordo de Cooperação: CNRS
• Pesquisador responsável: Carlos Augusto Pereira
• Beneficiário: Carlos Augusto Pereira
• Pesquisador Responsável no exterior: Renaud Wagner
• Instituição Parceira no exterior: Ecole Supérieure de Biotechnologie Strasbourg , França
• Instituição Sede: Instituto Butantan. São Paulo , SP, Brasil
• Município da Instituição Sede: São Paulo
• Vinculado ao auxílio: 09/09327-7 - Desenvolvimento de bioprocesso com células S2 para produção e purificação da glicoproteina recombinante do vírus da raiva (GPV) e estudo de sua antigenicidade, AP.R
• Assunto(s): Virologia
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Drosofila | Expressao Genica | Purificacao | Sfv | Virus

Resumo

Este projeto de cooperação cientifica reúne pesquisadores do Laboratório de Imunologia Viral do Instituto Butantan, em São Paulo, Brasil e do Departamento de receptores e proteínas da membrana IREBS FRE 3211 do CNRS/UDS, em Lllkirch, França. O laboratório brasileiro desenvolve tecnologias para a cultura de células animais para a produção e preparação de proteínas recombinantes de interesse para a virologia e imunologia. O grupo francês é especialista em bioquímica e biofísica de proteínas de membranas celular e desenvolve sistemas adequados para expressão purificação de proteínas heterólogas. O objetivo desta colaboração diz respeito à "Otimização de expressão e purificação em sistemas Semiliki Forest Vírus (SFV) e Drosophila melanogaster (S2) para a produção de proteínas, usando como modelos a glicoproteína do vírus rábico (RVGP). Em projeto desenvolvido anteriormente (FAPESP-CNRS 06/50338-4) estes grupos estabeleceram o sistema de expressão SFV e em projeto temático (02/09482-3) o grupo brasileiro desenvolveu o sistema S2. Neste contexto, o grupo brasileiro traz a sua experiência no domínio dos sistemas de produção de proteínas recombinantes e identificação viral, fases críticas que permitem uma otimização de linhagens celulares por infecção viral (desenvolvimento de titulação do vírus por ELISA e qRT-PCR). Tem aqui a missão de fornecer o seu know-how para otimizar as condições e as técnicas de produção (otimização de cultura e de expressão, a utilização de biorreatores etc...). O laboratório francês tem a tarefa de desenvolver os protocolos adequados para a extração e purificação destas proteínas (otimização das técnicas e análises por preparação de membrana celular, solubilização de proteínas, purificação) para permitir estudos funcionais. (AU)