Desenvolvimento e aplicação de colunas capilares enzimáticas na triagem de inibidores seletivos para a enzima NTPDase 2 de Leishmania

Resumo

Uma das estratégias empregadas no desenvolvimento de um novo fármaco envolve a descoberta de compostos que modulem a atividade de enzimas importantes ao processo infeccioso de agentes patogênicos. Uma abordagem interessante na triagem de novos ligantes é a utilização de métodos baseados na imobilização de enzimas em suportes cromatográficos acoplados a sistemas de cromatografia liquida multi e/ou unidimensional. O uso de IMERs (do inglês immobilized enzyme reactors) como fase estacionária acoplados a sistemas cromatográficos de alta eficiência constituem um método rápido e eficiente de screening de compostos de coleção ou de extratos naturais e possui vantagens em relação ao uso da enzima em solução tais como, fácil separação dos produtos de reação, aumento da estabilidade enzimática e uso de pequenos volumes de amostra. A enzima NTPDase2 de Leishmania funciona como um facilitador da infecção do patógeno, pois inibe a resposta imune do hospedeiro permitindo uma infecção silenciosa. A triagem de inibidores para esta enzima pode trazer importantes alternativas para o tratamento da leishmaniose e garantir melhor qualidade de vida às populações atingidas por endemias. Neste trabalho a enzima NTPDase2 será imobilizada para a construção de ICERs (immobilized capilarry enzyme reactors) que serão aplicados na identificação de substâncias ativas em coleções naturais e/ou sintéticas utilizando sistemas cromatográficos.