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Obtenção e cristalização de glicosiltransferases de interesse biotecnológico da biossíntese de antibióticos macrolídeos

Processo: 12/16631-7
Modalidade de apoio:Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
Data de Início da vigência: 01 de novembro de 2012
Data de Término da vigência: 31 de outubro de 2013
Área de conhecimento:Ciências Biológicas - Biofísica - Biofísica Molecular
Pesquisador responsável:Marcio Vinicius Bertacine Dias
Beneficiário:Larissa Antelo de Sá
Instituição Sede: Centro Nacional de Pesquisa em Energia e Materiais (CNPEM). Ministério da Ciência, Tecnologia e Inovação (Brasil). Campinas , SP, Brasil
Vinculado ao auxílio:10/15971-3 - Caracterização estrutural de enzimas envolvidas em vias de biossíntese de antibióticos com interesse biotecnológico, AP.JP
Assunto(s):Antibióticos   Moléculas bioativas   Cristalização   Macrolídeos   Citocromo P-450   Biossíntese
Palavra(s)-Chave do Pesquisador:Antibióticos | Biologia molecular | Cristalização | glicosiltransferase | macrolideos | cristalização

Resumo

Os produtos naturais representam uma das principais fontes de moléculas bioativas que podem ser usados com fins terapêuticos nos humanos. Entre os produtos naturais, existem vários antibióticos que são utilizados há várias décadas contra diversos tipos de infecções. Os antibióticos naturais são classificados quimicamente pelo seu mecanismo de ação e geralmente são moléculas complexas produzidas por micro-organismos, plantas e organismos marinhos, cuja manipulação química não é simples. Esses organismos produzem moléculas bioativas através de diversos passos enzimáticos que podem ser explorados biotecnologicamente na produção de derivados de antibióticos conhecidos. Entretanto, para isso muitas vezes a determinação de suas estruturas cristalográficas é necessária. Entre as enzimas relacionadas com a biossíntese, as glicosiltransferases têm grande aplicabilidade, pois quase todos os produtos naturais apresentam açúcares ligados a um centro principal, chamado de aglicone. Na biossíntese dos antibióticos macrolídeos, algumas glicosiltransferases são peculiares por formarem um complexo com uma enzima acessória homóloga ao citocromo P450, cuja função não é bem estabelecida. Neste projeto, que faz parte de um projeto maior que visa estudar estruturalmente várias enzimas de interesse biotecnológico na produção de antibióticos, pretende-se estudar glicosiltransferases relacionadas com a biossíntese de antibióticos macrolídeos, mais especificamente a tilosina e a pikromicina. Para tanto, os genes serão clonados, expressados e as proteínas purificadas e será realizado também testes de cristalização para a futura determinação das estrutura cristalográficas destas enzimas. (AU)

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Publicações científicas
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
CARDOSO, TABATA P.; DE SA, LARISSA A.; BURY, PRISCILA DOS S.; CHAVEZ-PACHECO, SAIR M.; DIAS, MARCIO V. B.. Cloning, expression, purification and biophysical analysis of two putative halogenases from the glycopeptide A47,934 gene cluster of Streptomyces toyocaensis. Protein Expression and Purification, v. 132, p. 9-18, . (10/15971-3, 12/23427-7, 12/16631-7)