Análise estrutural de halogenases identificadas em clusters gênicos da biossíntese de antibióticos glicopeptídicos

Resumo

Os produtos organohalogênicos, apesar de terem sido considerados no passado como compostos excêntricos, hoje representam um papel de destaque dentro do campo dos produtos naturais. Vários experimentos têm comprovado que compostos naturais podem ter sua atividade biológica alterada devido à presença ou ausência de halogênios ligados. Dentre os produtos naturais halogenados que apresentam destacada importância, encontram-se os antibióticos glicopeptídicos, como a vancomicina e teicoplanina, por apresentarem importantes aplicações clínicas no combate de infecções gram-positivas, principalmente contra S. aureus, incluindo cepas resistentes a meticilina. Tem sido provado que desclorovancomicina apresenta uma atividade 70% menor comparado com a vancomicina, assim mostrando a importância dos átomos de cloro para esta classe de antibióticos. Entretanto, apesar disso, as halogenases, que são as enzimas responsáveis por essa transferência, são muito pouco estudadas, mesmo com o seu potencial na produção de outros derivados de glicopeptídeos. Neste projeto, pretendemos realizar um estudo estrutural das halogenases identificadas no seqüenciamento de dois clusters gênicos para glicopeptídeos (a complestatina e a teicoplanina). Pretendemos estabelecer protocolos para produção dessas enzimas em sua forma solúvel, obter cristais e realizar a determinação de suas estruturas, para que possam mais futuramente serem alvo de mutações sítio dirigido para aumento de promiscuidade e conseqüentemente serem utilizadas na produção de novos derivados de glicopeptídeos.