Apoptose nas glândulas salivares humanas: Avaliação de marcadores na morfogênese e no processo de tumorigênese da glândula utilizando como modelos o adenoma pleomórfico e o carcinoma mucoepidermóide

Resumo

O projeto do aluno de Treinamento Técnico III envolverá a investigação de marcadores de apoptose em amostras de tumores benignos e malignos de glândula salivar por meio da técnica de imunoistoquímica e imunofluorescência. Serão selecionadas 50 amostras de adenoma pleomórfico e 50 amostras de carcinoma mucoepidermóide, respectivamente, o tumor benigno mais comum e o tumor maligno mais comum que acometem as glândulas salivares. As lâminas coradas em hematoxilina e eosina de cada caso serão analisadas, com o auxílio de um patologista, para checagem das estruturas glandulares presentes e seleção do material a ser utilizado na pesquisa. Dados demográficos e clinicopatológicos de cada caso serão estudados nos prontuários arquivados no SAME do Hospital AC Camargo. Após a escolha dos fragmentos a serem utilizados na pesquisa, os blocos de parafina serão separados e cortes histológicos desse material, com 3mm de espessura, serão utilizados para a realização da técnica de imunoistoquímica e imunofluorescênica, segundo protocolo do Departamento de Anatomia Patológica do Hospital AC Camargo. Serão avaliados os seguintes marcadores: PAR-4, PHLDA1, SPARC, Ki-67 e MUC-1. As reações imunoistoquímicas serão analisadas em microscópio óptico e os dados estudados de forma qualitativa e semiquantitativa, comparando-se a expressão dos marcadores e o estágio de diferenciação das glândulas salivares. Na análise semi-quantitativa será considerado o seguinte escore, baseado no número de células e intensidade de marcação: 0, negativo/fraco (quando até 10% das células estão marcadas); 1, moderado (10 - 50% das células marcadas) e 2, forte (mais de 50% das células marcadas). Na análise qualitativa será avaliada a localização da marcação (núcleo, citoplasma, membrana) e o padrão de marcação (difuso, focal). A comparação entre os escores das intensidades dos anticorpos será realizada por meio do teste qui-quadrado. Será comparada a intensidade de marcação dos anticorpos e características clínico-patológicas. A análise de sobrevida será calculada baseada no método de Kaplan-Meier. O nível de significância adotado é de 5% para todos os testes. Já a reação de imunofluorescência será analisa em microscópio confocal de forma qualitativa.