Caracterização bioquímica e estrutural das interações do exossomo de levedura com proteínas reguladoras com proteínas reguladoras de sua atividade

Resumo

O exossomo é um complexo formado por onze subunidades protéicas, que está presente em archaea e eucariotos, tem atividade de RNase exonucleolítica e está envolvido em processamento e degradação de todos os tipos de RNA. A caracterização funcional e estrutural do exossomo de archaea e de levedura já foi iniciada em nosso laboratório, trabalhos nos quais a estrutura do complexo do exossomo na archaea Pyrococcus foi determinada a partir de dados de espalhamento de raios X a baixo ângulo (Ramos et al., 2006), e por cristalografia (Navarro et al., 2008). Foi também obtido um modelo da arquitetura do complexo de eucariotos a partir de dados de interação entre as subunidades do exossomo de levedura (Luz et al 2007). Como o exossomo interage inespecificamente com RNA de fita simples e está envolvido em várias etapas diferentes de processamento e degradação de RNA, o modelo atual prevê que a regulação de sua atividade se dê através da interação deste complexo com outras proteínas. O estudo de fatores reguladores do exossomo foi iniciado em nosso laboratório, e proteínas de Pyrococcus abyssi (Luz et al., 2010) e de levedura (Granato et al., 2008; Santos et al., 2011) foram identificadas por modular a atividade do complexo. As proteínas Nop53p e Nop8p foram caracterizadas no laboratório e tiveram seus papéis reguladores determinados. Estas duas são proteínas nucleolares e regulam a atividade do exossomo durante o processamento de pré-rRNA, sendo que Nop53p ativa o exossomo, enquanto que Nop8p o inibe (Granato et al., 2008; Santos et al., 2011). Este trabalho tem como objetivo principal a continuação do estudo funcional e estrutural da interação do exossomo de levedura com as proteínas que regulam a atividade deste complexo. (AU)