Identificacao e caracterizacao de genes e proteinas envolvidas na regulacao do desenvolvimento de micorrizas em orquideas.

Resumo

Orquídeas possuem sementes diminutas que não possuem reservas para germinação. Na natureza, a germinação das sementes ocorre em simbiose mutualística com fungos micorrízicos, os quais transferem açúcares simples para os tecidos vegetais. Todas as orquídeas são mico-heterotróficas nos início de seu desenvolvimento, passando por um estágio mixotrófico, onde o suprimento de açúcares é de origem fúngica e fotossintética, e por fim um estagio autotrófico na fase adulta. Os mecanismos moleculares que controlam o desenvolvimento das micorrizas em orquídeas são desconhecidos, mas é provável que proteínas se acumulem especificamente durante a simbiose e sejam moduladas pelas necessidades energéticas de cada etapa do desenvolvimento da planta. Ò objetivo deste projeto é identificar e caracterizar proteínas envolvidas na regulação do desenvolvimento de micorrizas em orquídeas, através da análise comparativa dos metaproteomas e metatranscritomas. Para isto, serão utilizadas duas diferentes abordagens. Na primeira, será realizado um experimento in vitro para identificar e quantificar genes e proteínas expressos diferencial mente na germinação simbiótica e assimbiótica durante as fases mico-heterotrófica (aclorofilada), mixotrófica e autotrófica (clorofilada) do desenvolvimento da planta. Na segunda abordagem, será feita a análise do metatranscritoma e metaproteoma de céluás células colonizadas e células não-colonizadas de protocórmios simbióticos de O. maculata, segregadas por microdissecção a laser. A análise concomitante do metatranscritoma e metaproteoma de orquídeas simbióticas poderá responder questões básicas sobre os mecanismos de regulação da interação planta-fungo e sua fisiologia, e fornecer subsídios para o entendimento da regulação de outras endomicorrizas. (AU)