Enzimas imobilizadas: novos modelos para a triagem de ligantes

Resumo

O uso de biorreatores enzimáticos capilares e de nanopartículas magnéticas para a triagem de ligantes tem sido adotado como novas técnicas de HTS, do inglês high throughput screening, o que garante uma elevada eficiência no ensaio. No projeto proposto, a integração das duas técnicas de imobilização é uma inovação em relação aos trabalhos encontrados na literatura, que assegura uma maior seletividade e especificidade durante o processo de triagem de ligantes, proporcionada pela enzima imobilizada. Os biorreatores de nanopartículas magnéticas possibilitam o uso de coleções combinatórias sintéticas ou naturais, sem prévio fracionamento, "pescando" os ligantes presentes onde, com posterior integração ao biorreator capilar é possível caracterizar-se o inibidor em relação aos valores de Ki (constante de inibição), Kd (constante de afinidade) e IC50 (do inglês, half maximal inhibitory concentration). O alvo selecionado é a enzima acetilcolinesterase (AChE), que atua no sistema nervoso central e rapidamente hidrolisa a acetilcolina em colina e ácido acético. Sendo um alvo validado para o tratamento da doença de Alzheimer e desenvolvimento de novos inseticidas, a busca por novos ligantes da AChE é estimulada pela diversidade estrutural dos mesmos. (AU)