Estudos cinéticos de reações mediadas por oxidantes gerados por neutrófilos: mecanismos de ações deletérias e desenvolvimento de inibidores enzimáticos

Resumo

São inúmeras as evidências apresentadas na literatura científica que demonstram o papel dos ácidos hipo-halosos, ou seja, ácido hipocloroso (HOCl) e hipobromoso HOBr) como agentes de degradação de biomoléculas. Neste contexto, a identificação de biomarcadores dos efeitos desses oxidantes, tais como 3-clorotirosina, proteínas e ácidos nucleicos modificados por HOCl e HOBr, etc., já foram largamente demonstrados e correlacionados com várias patologias como Alzheimer, Parkinson, doença pulmonar obstrutiva crônica, entre outras. Nesta mesma direção, inibidores das enzimas envolvidas direta ou indiretamente na biossíntese desses oxidantes são objeto de busca como alvos para o desenvolvimento de novos fármacos. Este projeto tem como objetivo estudar cineticamente e assim elucidar mecanismos de reações de relevância nesta área. Trata-se de projeto que almeja dar sequência a estudos em desenvolvimento em nosso laboratório, mas agora com uma abordagem mais aprofundada sob o ponto de vista da reatividade dos oxidantes endógenos com as biomoléculas alvos. O tema central é medir, utilizando tecnologia de cinética rápida (Stopped-Flow), as constantes de velocidade das reações e assim inferir sobre o seu mecanismo e importância das mesmas no meio biológico. Entre as reações que pretendemos estudar incluem-se: reatividade de HOCl, HOBr e suas haloaminas taurina cloramina e bromamina com nucleosídeos; estudo de agregação de proteínas (formação de proteínas amiloidais) provocada por suas oxidações; estudo da inibição de mieloperoxidase por 4-aminochalconas e correlatos, buscando a medição das constantes de velocidade entre as formas redox ativa da enzima e os inibidores; estudo de inibição de NADPH oxidase por ésteres de ácidos fenólicos (constantes de velocidade entre estes compostos e ânion superóxido); estudos da reatividade de radicais livres de apocinina (inibidor de NADPH oxidase) com grupos sulfidrilas. Temos convicção de que estes estudos poderão culminar com um melhor entendimento destas reações deletérias e com o desenvolvimento de inibidores para as enzimas envolvidas, como demonstraremos no projeto. (AU)