Avaliação de expressão de genes candidatos em sistema de RNA interferente (RNAi) em Diaphorina citri (Kuwayama) (Hemiptera:Psyllidae), vetor do Huanglongbing dos citros

Resumo

O psilídeo Diaphorina citri (Kuwayama) tornou-se nos últimos anos um dos mais importantes vetores na cultura de citros, em função dos crescentes prejuízos causados às plantas pela transmissão das bactérias Candidatus Liberibacter americanus e Candidatus Liberibacter asiaticus, agentes causais do huanglongbing (HLB) dos citros. O manejo do HLB é baseado no uso de mudas sadias, na erradicação de plantas infectadas e no controle químico do vetor, principalmente pelo controle químico. No entanto, o uso contínuo e intenso de inseticidas é problemático, não só pelos custos financeiros, mas ambientais que o uso excessivo acarreta. Uma das promessas de novas tecnologias, como o silenciamento gênico por RNA de interferência (iRNA), tem sido seu uso no controle de pragas e vetores, reduzindo assim os altos custos no desenvolvimento de novas moléculas e tornando o controle mais eficiência e específico. Trabalhos recentes mostram resultados efetivos utilizando a RNAi para silenciamento de genes vitais à manutenção da homeostase celular e síntese de quitina. Desse modo, este trabalho tem como objetivo analisar a regulação da expressão gênica, mortalidade e/ou alterações fenotípicas de Diaphorina citri em resposta a RNAi para genes alvos específicos. Regiões codificantes de genes alvos foram selecionadas e amplificadas por RT-PCR, e suas sequências foram confirmadas para a subsequente produção dos RNAs dupla-fita (dsRNA) por transcrição in vitro. Posteriormente serão realizados testes in vivo para incorporação de dsRNAs em diferentes concentrações via alimentação. A alteração da expressão quantitativa e temporal dos genes será confirmada por PCR quantitativo. (AU)