Fatores de transcrição e a regulação de genes relacionados à parede celular de Histoplasma capsulatum durante estresse

Resumo

Histoplasma capsulatum é uma espécie fúngica de importância médica nas Américas do Norte e Latina. A parede celular, principal interface do fungo com o hospedeiro, é constituída principalmente de polissacarídeos estruturais, os quais podem sofrer remodelamento durante condições de estresse. Muitos fatores de transcrição estão envolvidos na resposta a diferentes condições de estresse em fungos, incluindo Mns2/4, Hsf1, Rlm1, Swi4, Adr1 e Crz1. Durante o primeiro período de desenvolvimento do projeto de pós-doutorado relacionado ao pedido de bolsa BEPE, nós mostramos que elementos de transcrição reconhecidos pelos fatores Hsf e Adr1 são abundantes em regiões promotoras de todos os grupos de genes relacionados à síntese/remodelamento dos principais grupos de polissacarídeos da parede celular. Adicionalmente, nós mostramos que condições de estresse causadas por baixo pH e NaNO2 induziram mudanças substanciais no perfil de transcrição de genes codificadores de fatores de transcrição e relacionados à parede celular. O estresse causado por baixo pH aumentou os níveis de mRNA dos genes codificadores de Hsf,Msn2/4, Crz1, alfa- e beta-glucana sintases, quitina sintase, quitinase e beta glucanase. De maneira oposta, o estresse nitrosativo induziu a diminuição nos níveis de mRNA de Crz1, quitina sintase, beta glucosidase e Rho1 GTPase. O presente projeto tem como objetivo avaliar a importância funcional de fatores de transcrição de Histoplasma na regulação de genes relacionados à síntese/remodelamento de polissacarídeos da parede celular durante diferentes condições de estresse e relacionadas à infecção. Nós avaliaremos o papel de alguns fatores de transcrição, escolhidos entre aqueles citados acima, utilizando mutantes com baixa expressão gênica construídos por RNA de interferência. Nós também faremos a caracterização de sequências regulatórias por meio do truncamento e/ou inserção de cópias de elementos de transcrição em promotores de genes relacionados à parede celular. Esse projeto será realizado na Ohio State University, Columbus, EUA, sob a supervisão do Dr. Chad A. Rappleye. (AU)