TransAppIL - Permeação cutânea de entidades proteicas estabilizadas estruturalmente e funcionalmente, carreadas por líquidos iônicos.

Resumo

Escondidas sob um biofilme polimérico protetor, as bactérias patogênicas formam autênticas cidades microbianas e podem desencadear todo o tipo de danos em infecções cutâneas. Os biofilmes bacterianos encontram-se abrigados abaixo da camada exterior da pele, o estrato córneo, que serve como uma barreira natural para a maioria dos agentes terapêuticos. Com uma tal proteção de dupla camada, as bactérias nocivas podem tornar-se especialmente perigosas, principalmente através do aumento da resistência aos antibióticos, que pode aumentar de 50 a 1000 vezes. Os líquidos iônicos (LIs) são compostos químicos peculiares que conseguem ultrapassar as complicadas defesas tanto das bactérias como da pele e ajudar a tratar feridas crônicas e degradação de feridas que muitas vezes resultam de biofilmes bacterianos. Isto adiciona claramente excelentes perspectivas aos LIs para ajudarem na entrega de moléculas bioativas ao local de infecção pelo patógeno através da disrupção dos biofilmes e aumento da permeação transdérmica. Os LIs são feitos de sais, ions carregados positiva e negativamente mantidos unidos por sua carga, com pontos de fusão reduzidos de tal forma que estes são líquidos à temperatura ambiente, exibindo no entanto uma alta viscosidade. Dos vários LIs pesquisados na literatura científica da especialidade, o geranato de colina e o oleato de colina, emergiram como LIs multifuncionais, uma vez que foi relatado exibirem uma excelente atividade antimicrobiana, toxicidade mínima para as células epiteliais bem como para a pele, e eficácia no aumento da permeação para entrega de fármacos, ao promoverem a sua entrega nas camadas mais profundas do tecido da pele sem provocar irritação na mesma. Doenças de pele tais como acne, eczema e úlceras diabéticas, podem infectar e desenvolver uma camada blindada de células bacterianas (ou seja, um biofilme), que é bastante difícil de eliminar. Enquanto os LIs parecem desestruturar a capa polissacarídica excretada pelas bactérias que caracteriza os biofilmes, na pele é provável que as moléculas dos LIs deslizem entre os compostos gordos que constituem as células da pele, criando pequenas aberturas através das quais as entidades bioativas podem permear. Tomando em consideração que mais de três quartos das infecções em seres humanos estão associadas a biofilmes bacterianos, ligado ao fato de que mais de 65% das infecções adquiridas em ambiente hospitalar são causadas por biofilmes bacterianos, os LIs poderão apresentar benefícios terapêuticos maciços. Este projeto de pesquisa visa desenvolver um sistema biomimético transdérmico com o objetivo de proteger e estabilizar (tanto estrutural como funcionalmente) entidades proteicas bioativas (com comprovadas atividades antimicrobianas, antioxidantes, cicatrizadoras de feridas, anti-rugas e melhoradoras da elasticidade da pele), ao mesmo tempo que promove a sua permeação através das camadas mais profundas da pele, tirando partido da utilização de LIs selecionados. O desenvolvimento, por um lado, de uma formulação líquida iônica adequada, altamente viscosa, capaz de estabilizar estruturalmente e funcionalmente sericina e partículas bacteriofágicas estritamente líticas e, por outro, de um sistema híbrido de biohidrogel impregnado com a formulação de líquido iônico, será seguido de (i) estudos de permeação in vitro usando células de difusão de Franz e pele da orelha de porco como membrana, simulando pele humana; (ii) avaliação do potencial de citotoxicidade através do ensaio de MTT usando fibroblastos murinos 3T3; (iii) avaliação do potencial anti-inflamatório através da determinação do óxido nítrico numa cultura de macrófagos de murino (RAW 264.7) estimulados com lipopolissacarídeo bacteriano (LPS); (iv) avaliação do potencial de genotoxicidade pelo teste Cometa"; (v) avaliação do potencial antioxidante por meio do ensaio de DPPH; e (vi) avaliação da estabilidade em armazenagem. (AU)