Desenvolvimento de Sondas Fluorescentes para Determinação de Sítios de Ligação em Albumina: Estudo da Relação entre Estrutura Molecular, Constante de Associação e Especificidade

Resumo

A albumina sérica humana, HSA, é a principal proteína constituinte do plasma sanguíneo. Dentre as suas funções destaca-se a sua atuação no transporte de fármacos. Esta propriedade é particularmente relevante no contexto farmacocinético, uma vez que, a interação fármaco-HSA poderá interferir na biodisponibilidade do mesmo no organismo, afetando a sua ação terapêutica. Portanto, avaliar a interação entre fármacos ou outras substâncias exógenas e a HSA é de grande importância para o entendimento das características farmacocinéticas das mesmas. A HSA possui dois principais locais de ligação denominados de sítio I e sítio II. A determinação dos locais de ligação dos fármacos na HSA é feita pelo uso de sondas fluorescentes que se ligam nestes sítios. Estudos recentes em nosso grupo de pesquisa, bem como um levantamento crítico dos resultados apresentados na literatura, revelaram inconsistências na aplicação de sondas dansiladas de sítio I o que tem levado a interpretações equivocadas das características de substâncias em estudo no que diz respeito ao sítio de ligação na albumina. Portanto, este projeto tem por objetivo o estudo e síntese de novos aminoácidos dansilados que possam ajudar a elucidar os sítios de ligação de fármacos em HSA. Especificamente, pretende-se caracterizar os parâmetros de interação tais como constantes de ligação (técnicas espectroscópicas e calorimétricas), caracterizações dos sítios por estudos competitivos, estudos de interação por dicroísmo circular induzido, estudos de dinâmica molecular, entre outros. Como modelos usaremos os aminoácidos dansilados dansilamida, dansilarginina e dansilisina para o sítio I e dansilprolina, dansilnorvalina e dansilserina para o sítio II. De posse dos resultados com estes compostos serão propostas modificações estruturais que levem a novos compostos dansilados com maior especificidade para o sítio I da HSA.