Ativação de Genes Crípticos em Actinobactérias Através da Indução de Resistência a Antibióticos

Resumo

Micro-organismos são uma inesgotável e importante fonte de metabolitos secundários bioativos com diferentes modos de ação. As actinobactérias, têm se mostrado eficiente para realizar a biossíntese de uma grande variedade de metabolitos secundários bioativos, em especial de antibióticos. Avanços recentes no sequenciamento do genoma de algumas actinobactérias do gênero Streptomyces, revelaram que essas actinobactérias apresentam potencial para produzir muito mais metabólitos secundários do que aqueles que são identificados usualmente. Assim, muitos agrupamentos de genes microbianos podem estar silenciados "cryptic genes" sob as condições de crescimento padrão em laboratório. Várias estratégias têm sido aplicadas para a ativação de vias crípticas microbianas, como OSMAC, expressão heteróloga e homologa, co-cultivo e engenharia ribossômica. Dentre elas a engenharia ribossômica nos parece mais atraente, devido ao fato de não necessitar do conhecimento global do genoma bacteriano. Neste sentido, este projeto de pesquisa tem como objetivo principal aplicar a engenharia ribossômica para gerar mutantes de três linhagens de actinobactérias (CAAT 1-54, EUCAL 26 e CAAT 2-63), previamente estudadas em nosso laboratório, para avaliar a superprodução dos antibióticos lisolipina, nigericina e actinomicina D, além da identificação de novos metabolitos secundários crípticos através das análises por LC-MS/MS dos mutantes gerados. (AU)