Perfil proteômico da película adquirida do esmalte formado in situ ou in vivo

Resumo

A película adquirida é considerada uma camada orgânica, livre de bactérias, que se forma como resultado da adsorção seletiva de proteínas salivares à superfície do esmalte dentário. É esperado que exista uma diferença no perfil proteico da película adquirida formada in situ ou in vivo, sendo esta comparação nunca avaliada até o momento. Assim, o objetivo deste projeto será comparar a composição proteica da película adquirida do esmalte (PAE) formada in situ e in vivo. No estudo, 48 espécimes de esmalte humano (4x4mm) serão confeccionados para a etapa in situ, 8 voluntários serão moldados com alginato de gesso e utilizarão um aparelho mandibular removível (Bauru in situ Pellicle Model - BISPM) por duas horas, contendo 6 blocos de esmalte, sendo 3 para cada lado do aparelho. A coleta da PAE será feita utilizando um papel filtro de eletrodos pré-mergulhado em ácido cítrico 3%, em seguida será esfregado sobre os espécimes e congelados até o preparo da análise proteômica. Na etapa in vivo, serão utilizados os mesmos voluntários e a coleta será da mesma forma da etapa in situ, porém a PAE será coletada da superfície vestibular dos dentes superiores e inferiores, após uma meticulosa profilaxia. Todas as amostras serão processadas por nLC-ESI-MS/MS. A identificação das proteínas será obtida utilizando o software ProteinLynx Global Server (PLGS) versão 3,0 através do algoritmo de contagem de íons incorporado ao software, utilizando a base de dados Homo sapiens (UniProtKB/Swiss-Prot). A diferença de expressão entre os grupos, será obtida através do mesmo software, considerando-se p<0,05 para as proteínas subreguladas e 1-p>0,95 para as proteínas suprareguladas.