Avaliação de novos peptídeos salivares para tratamento da candidíase oral

Resumo

Considerando que o sistema de defesa do hospedeiro e os tratamentos antimicrobianos convencionais não são totalmente eficazes contra microorganismos patogênicos, o uso de peptídeos modificados é bastante motivador. Assim, o objetivo deste estudo será avaliar o efeito potencial de peptídeos que ocorrem naturalmente na saliva (RR14 e DR9) e um peptídeo híbrido (DR9-RR14) no revestimento da mucosa oral para proteger as células epiteliais contra a colonização por C. albicans, com uma abordagem inovadora de tratamento para candidíase oral em tecido reconstruído humano. Uma película formada pelos peptídeos e subsequente formação de biofilme de 48 horas serão realizadas em epitélio oral humano reconstruído (HOE), de acordo com os grupos experimentais. Para a formação da película, os grupos de controle serão incubados com PBS e grupos experimentais com peptídeos numa concentração de IC50 de acordo com o Killing assay. Após o crescimento do biofilme, os tecidos do HOE serão fixados imediatamente. Avaliações histológicas e morfológicas utilizando ensaios de hematoxilina e eosina (H & E) e ácido periódico de Schiff (PAS) serão realizadas. Para determinar a apoptose celular, a marcação terminal da extremidade de entupimento de desoxinucleotidil transferase dUTP (TUNEL) será analisada através de fluorescência utilizando o kit de detecção de morte celular in situ (Roche, West Sussex, Reino Unido) e as secções de HOE serão fotografadas sob o microscópio de fluorescência. Os testes estatísticos serão definidos com base nos fatores de variação dos experimentos e na distribuição dos dados e homocedasticidade. O nível de significância será estabelecido em 5%.Relevância e Importância Clínica: Desenvolver peptídeos antimicrobianos com características de amplo espectro também é especialmente atraente, pois múltiplos patógenos poderiam ser potencialmente direcionados com um tratamento que possui atividade antibacteriana, antiviral ou antifúngica. Assim, em combinação, os peptídeos têm o potencial de reduzir a taxa de emergência de micróbios resistentes, uma vez que a pressão seletiva se afasta de um alvo molecular específico.