Mecanismos de captação de heme em Chromobacterium violaceum

Resumo

O ferro é um metal importante em diversos processos celulares e altas quantidades deste são encontradas no grupo heme de hemoproteínas, como a hemoglobina. Para explorar esta abundante fonte de ferro do hospedeiro, muitos patógenos apresentam mecanismos de captação e degradação de heme. Neste trabalho buscaremos identificar estes mecanismos na bactéria Chromobacterium violaceum, uma beta-proteobactéria Gram-negativa encontrada no solo e água de regiões tropicais, causadora de graves infecções oportunistas em humanos. A análise in silico do genoma de C. violaceum ATCC 12472 revelou o operon chuPRSTUV como candidato a codificar um sistema de captação e degradação de heme. Para caracterizar tal sistema serão obtidas linhagens mutantes por troca alélica com deleção do operon completo e com deleção de genes individuais. Os mutantes serão caracterizados in vitro em ensaios de captação de diferentes fontes de heme e in vivo em ensaios de virulência em camundongos. Além disso, serão realizados ensaios bioquímicos in vitro com as proteínas ChuP e ChuS purificadas para determinar seus papéis na regulação do operon chuPRSTUV e na degradação de heme, respectivamente. De forma geral, os dados obtidos neste trabalho ajudarão a elucidar as estratégias que C. violaceum utiliza para captar e degradar heme do ambiente e do hospedeiro e a importância do heme na patogênese desta bactéria.