| Processo: | 18/01388-6 |
| Modalidade de apoio: | Auxílio à Pesquisa - Regular |
| Data de Início da vigência: | 01 de julho de 2018 |
| Data de Término da vigência: | 30 de junho de 2020 |
| Área do conhecimento: | Ciências Biológicas - Genética - Genética Molecular e de Microorganismos |
| Pesquisador responsável: | José Freire da Silva Neto |
| Beneficiário: | José Freire da Silva Neto |
| Instituição Sede: | Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (FMRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil |
| Município da Instituição Sede: | Ribeirão Preto |
| Bolsa(s) vinculada(s): | 19/20292-2 - Técnicas de biologia molecular e de microbiologia como apoio para estudar homeostase de ferro em Chromobacterium violaceum, BP.TT |
| Assunto(s): | Chromobacterium violaceum Ferro |
| Palavra(s)-Chave do Pesquisador: | Captação de ferro por sideróforos | Chromobacterium violaceum | Homeostase de ferro em bactéria | Imunidade nutricional | Metalorregulador Fur | Resposta a limitação de ferro | Regulação Gênica em Bactérias |
Resumo
O ferro é essencial para a maioria dos organismos, mas possui baixa solubilidade e alta toxicidade nos ambientes aeróbios, nos quais predomina a vida. As bactérias possuem sofisticados mecanismos para manter o controle dos níveis de ferro, seja no ambiente ou no interior de hospedeiros vertebrados. Neste trabalho, serão investigados o papel e a regulação de genes candidatos para sistemas de captação, utilização e regulação da homeostase de ferro em Chromobacterium violaceum. Como a C. violaceum é uma bactéria de vida livre encontrada no solo e na água que pode causar sérias infecções em humanos, o envolvimento destes sistemas em patogenicidade também será investigado. A identificação global dos genes regulados em limitação de ferro e pelo fator de transcrição Fur será realizada através do sequenciamento em larga escala de bibliotecas de RNA (RNAseq). Genes alvos serão validados quanto a expressão e regulação direta por Fur. Em relação aos sistemas de captação de ferro, serão identificados quais sideróforos endógenos são produzidos por C. violaceum e quais são suas vias de síntese e de captação por receptores dependentes de TonB. O envolvimento de vesículas de membrana externa (OMVs) na captação de ferro será investigado pela análise do proteoma das OMVs em condições de escassez de ferro. Por fim, as linhagens mutantes obtidas no trabalho serão utilizadas em ensaios de virulência em camundongos. Os resultados obtidos neste projeto deverão revelar quais estratégias C. violaceum utiliza para obter ferro do hospedeiro e para evitar intoxicação por este metal, além de contribuir na identificação dos determinantes de virulência desta bactéria oportunista. (AU)
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