Fatores de transcrição da família Fur e a resposta a ferro e zinco em Chromobacterium violaceum

Resumo

Os metais de transição ferro e zinco são micronutrientes essenciais a todas as formas de vida. Tanto no ambiente quanto no hospedeiro estes metais são pouco disponíveis para as bactérias, mas paradoxalmente são tóxicos quando em excesso. A carência de ferro e zinco imposta pelo hospedeiro é um sinal para regulação de genes de virulência, via fatores de transcrição da família Fur, em vários patógenos bacterianos. Neste trabalho, pretendemos caracterizar a resposta à limitação de ferro e de zinco e o papel dos fatores de transcrição Fur e Zur na bactéria Chromobacterium violaceum, um patógeno oportunista ocasional de humanos geralmente encontrado no solo e na água. Devido ao difícil diagnóstico e ao tratamento muitas vezes equivocado, as infecções por C. violaceum apresentam alta taxa de mortalidade. O sequenciamento do genoma desta bactéria indicou seu potencial de adaptação à ambientes variados, mas ainda são poucos os estudos funcionais. Para definir o papel de Fur e Zur na fisiologia e na virulência de C. violaceum serão obtidas linhagens mutantes e estas linhagens serão caracterizadas in vitro em meio de cultura e in vivo em modelo de infecção em camundongos. A identificação dos regulons Fur e Zur e dos estimulons de ferro ou zinco será realizada por RNA-Seq, com subsequente validação dos perfis de expressão e dos sítios de ligação ao DNA. Genes de cada regulon que codifiquem potenciais fatores de virulência serão selecionados para posterior caracterização. Desta forma, os resultados obtidos neste trabalho deverão contribuir para entender como C. violaceum enfrenta a imunidade nutricional imposta pelo hospedeiro utilizando seus sistemas regulatórios de resposta aos metais ferro e zinco.