Estudo dos mecanismos de transporte celular da subunidade Rrp44 do exossomo em Saccharomyces cerevisiae

Resumo

O exossomo é um complexo multiproteico envolvido no processamento de quase todos os tipos de RNA na célula eucariótica. Dentre as principais funções do exossomo estão a degradação de RNAs não codificantes, o turnover de mRNAs e a maturação do RNA ribossomal. Em Saccharomyces cerevisiae, o exossomo está presente tanto no núcleo quanto no citoplasma, mas sua composição varia de acordo com sua localização. O exossomo nuclear possui 11 subunidades, sendo que duas possuem atividade catalítica, Rrp44 e Rrp6, enquanto o exossomo citoplasmático não possui a subunidade Rrp6. Apesar do exossomo citoplasmático e nuclear possuírem composições semelhantes, não se sabe se o complexo exossomo é transportado para o núcleo como um complexo previamente montado ou se as diferentes subunidades são transportadas individualmente. Devido a principal função do exossomo nuclear ser a maturação dos pre-rRNAs, é de grande interesse descobrir como o exossomo é transportado do citoplasma para o núcleo, além de descobrir como o complexo é montado. Para melhor entender a importação do exossomo, nosso grupo de pesquisa estuda o transporte da subunidade catalítica Rrp44 através da microscopia de fluorescência e confocal. No intuito de confirmar os resultados obtidos no primeiro ano deste projeto, estudos utilizando as técnicas de photobleaching e microscopia confocal Spinning Disk são necessários. Além disso, um melhor marcador nuclear e uma resolução melhor das imagens permitiriam confirmar nossos resultados. O Professor Olivier Gadal é referência na área de transporte ribossomal em leveduras utilizando microscopia de alta resolução. Nós acreditamos que os experimentos que serão realizados no laboratório do Professor Gadal nos ajudarão a elucidar a biogênese do exossomo e entender melhor a função deste importante complexo na célula.