Desenvolvimento de organóides testiculares e sua utilização para potencial maturação espermatogonial em Zebrafish (Danio rerio) e Tambaqui (Colossoma macropomum)

Resumo

Os organóides testiculares são aglomerados tridimensionais originados a partir de células testiculares que apresentam in vitro a mesma citoarquitetura e funcionalidade de um testículo em condições in vivo. Por conta destas características, esta tecnologia viabiliza estudos na área fundamental como alternativas à experimentação animal e aos modelos clássicos de linhagem celular. Até o presente momento não há estudos direcionados ao desenvolvimento de organóides testiculares em peixes em geral. Dessa forma, levando em consideração a sua aplicabilidade para produzir espermatozóides in vitro, a mesma poderia ser utilizada para espécies que apresentam longo período de maturação sexual, como é o caso do Tambaqui (Colossoma macropomum). Sendo assim, o presente projeto tem como objetivo desenvolver organóides testiculares 3D em peixes utilizando a espécie Danio rerio como modelo e Colossoma macropomum como espécie nativa de interesse econômico. Além disso, utilizaremos esta tecnologia para acelerar a maturação de espermatozóides in vitro de Tambaqui. Para tanto, os organóides testiculares serão primeiramente caracterizados morfologicamente e funcionalmente. Posteriormente, os mesmos serão submetidos a testes hormonais e de expressão gênica (RTqPCR) para validar sua viabilidade. Em um segundo momento, será analisado o perfil transcriptômico de testículos em maturação e de neo-machos de Tambaqui via (RNAseq), identificando candidatos envolvidos na maturação desta espécie. Por fim, os candidatos pré-selecionados serão testados funcionalmente via organóides testiculares em Tambaqui com o intuito de acelerar o processo de maturação e formação dos gametas nesta espécie. Em resumo, este projeto de pesquisa possibilitará o desenvolvimento de modernas tecnologias no estudo da espermatogênese/espermatogônia tronco de peixes, abrindo novas oportunidades de estudo, tanto na Ciência fundamental, quanto em áreas aplicadas, como a Aquicultura. Este projeto faz parte de dois processos FAPESP em andamento (Auxílio Regular à Pesquisa - 2020/03569-8; Auxílio Regular à Pesquisa - FAPEAM-FAPESP 2020/08627-6). (AU)