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Avaliação funcionalidade molecular de MICA e MICB em indivíduos saudáveis

Processo: 21/13672-3
Modalidade de apoio:Auxílio à Pesquisa - Regular
Data de Início da vigência: 01 de abril de 2022
Data de Término da vigência: 30 de setembro de 2024
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Imunologia - Imunogenética
Pesquisador responsável:Camila Ferreira Bannwart Castro
Beneficiário:Camila Ferreira Bannwart Castro
Instituição Sede: Faculdade do Sudoeste Paulista (FSP). Instituição Chaddad de Ensino (ICE). Avaré , SP, Brasil
Pesquisadores associados:Erick da Cruz Castelli ; Igor Otavio Minatel ; Márjorie de Assis Golim
Bolsa(s) vinculada(s):23/09608-3 - Quantificação de receptor ativatório ligante de proteínas de estresse -nkg2d- em individuos com alelos codificantes de proteína ligante solúvel, BP.TT
Assunto(s):Fibroblastos  Monócitos  Cromossomos humanos par 6  Complexo principal de histocompatibilidade  Ensaio de imunoadsorção enzimática  Expressão gênica  RNA mensageiro  Sequenciamento Sanger 
Palavra(s)-Chave do Pesquisador:Elisa | expressão de RNA mensageiro | Mica | Micb | monócitos | seqüenciamento Sanger | complexo do MHC

Resumo

As moléculas MICA e MICB são expressas constitutivamente em fibroblastos, monócitos e células epiteliais, no entanto, sua expressão é estimulada em condições como o câncer, infecções e doenças autoimunes, agindo como marcador de estresse celular. Os genes MICA e MICB estão codificados no cromossomo 6 na região do Complexo Principal de Histocompatibilidade (MHC), a região mais variável do genoma humano. Variantes desses genes parecem estar associadas a um perfil diferencial de expressão das moléculas na superfície das células e à liberação de moléculas solúveis, modulando o sistema imunológico ao interagir com o receptor NKG2D, presente em células natural killer e subpopulações de linfócitos T. Esse projeto visa avaliar a funcionalidade molecular de MICA e MICB em indivíduos saudáveis, identificando marcadores genéticos que modificam o perfil transcricional dos genes, seus padrões de edição e produção de moléculas solúveis, em células mononucleares em situações fisiológicas e após estímulo. Para isso, selecionaremos amostras com um perfil genético característico após sequenciamento por Sanger (e.g., portadoras de variantes não sinônimas), com posterior cultura de células mononucleares. Em seguida, quantificaremos a expressão de MICA e MICB em diferentes níveis (mRNA, proteína de membrana e forma solúvel) antes e após estímulo com peróxido de hidrogênio ou LPS. Os dados de expressão serão correlacionados com o perfil genético das amostras. Demonstrar a heterogeneidade de expressão dessas moléculas na superfície celular e/ou liberadas de maneira solúvel no sobrenadante pode servir de base para compreender a dinâmica entre as moléculas MICA e MICB em diversas situações patológicas ou transplantes, além de auxiliar em estudos de associações com doenças. (AU)

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