Desenvolvimento de sonda química contra a lemur tirosina quinase 3 para o tratamento de Câncer de Mama e reduzir resistência a tratamentos atuais

Resumo

O Câncer de Mama é o mais comum entre mulheres no mundo. Apesar de algumas terapias já existirem, a grande heterogeneidade da doença torna necessária uma constante busca por novo alvos e drogas. Em uma triagem de RNA silenciadores foi encontrado um promissor alvo no tratamento desta patologia, a Lemur Tirosina Quinase 3 (LMTK3). Esta proteína é um regulador de receptores de estrogênio e a sua inibição mostrou efeitos antitumorais até em células de Câncer de Mama triplo-negativo (forma mais letal). Esta quinase também está envolvida no mecanismo de resistência aos tratamentos oncológicos atuais. Por isso, neste trabalho, buscaremos inibidores potentes e seletivos para LMTK3. Será feito um estudo de relação estrutura-atividade com a geração de análogos dos inibidores encontrados de uma biblioteca de compostos, com acompanhamento sendo feito por inibição da cinética enzimática. Os candidatos mais promissores passarão por ensaios de NanoBRET para avaliar sua ligação específica no alvo e a potência intracelular. Os estudos de atividade serão guiados pela geração de co-cristais de LMTK3 com os inibidores estudados. Para estudar os efeitos celulares dos melhores análogos, faremos ensaios funcionais em 2 linhagens celulares de Câncer de Mama: MCF7 e MDA-MB-231. Por ser conhecido que LMTK3 modula a resistência das células cancerígenas ao tratamento com tamoxifeno e doxorubicina, testaremos terapias combinadas de nosso inibidor com essas drogas a fim de testar os efeitos potenciais destas associações. Por fim, para compreender os mecanismos celulares ocorridos com inibição de LMTK3, analisaremos por BioID como a rede de interações proteicas desta quinase é afetada pela adição do nosso inibidor. (AU)