Detecção e caracterização molecular de Bartonella spp. em flebotomíneos (Diptera: Psychodidae) nas regiões norte e nordeste do Brasil

Resumo

A família Bartonellaceae é formada por a-proteobactérias Gram-negativas intracelulares facultativas e capazes de infectar diversos tipos celulares, principalmente eritrócitos e células endoteliais, de uma grande variedade de hospedeiros. São os agentes causadores das bartoneloses, enfermidades emergentes e re-emergentes com amplo espectro clínico e responsáveis por danos à saúde humana e animal. A principal forma de transmissão desses agentes é por meio de artrópodes hematófagos, tornando a busca por vetores essencial. Os flebotomíneos (Diptera, Psychodidae, Phlebotominae) compreendem um dos principais grupos de artrópodes apontados como vetores de Bartonella, notavelmente pela sua participação no ciclo de transmissão da Doença de Carrión, causada por Bartonella baciliformis, nos países andinos. Estão amplamente distribuídos pelo território brasileiro, com um total de 275 espécies diferentes identificadas. Dessa forma, o presente estudo tem como objetivo investigar, por meio de técnicas moleculares, a ocorrência e diversidade genotípica de Bartonella em flebotomíneos capturados em Reservas Ecológicas e Parques Nacionais de sete estados brasileiros nas regiões Norte e Nordeste do Brasil (Acre, Alagoas, Bahia, Ceará, Pará, Pernambuco e Roraima). Um total de 676 espécimes de flebotomíneos, pertencentes a 14 gêneros diferentes (Bichromomya, Brumptomyia, Evandromyia, Lutzomyia, Micropygomyia, Nyssomyia, Pintomyia, Pressatia, Psathromyia, Psychodopygus, Sciopemyia, Trichophoromyia, Trichopygomyia e Viannamyia) serão submetidos à extração de DNA, PCR para o gene endógeno cox-1 e subsequente PCR em tempo real quantitativa (qPCR) para Bartonella spp. baseada no gene nuoG. As amostras positivas serão submetidas a ensaios de PCR convencional baseados na região intergênica do gene 16S-23S do RNA ribossomal (ITS) e nos genes gltA, rpoB, ribC, pap-31, ftsZ, groEL e nuoG de Bartonella spp. a fim de se realizar a caracterização molecular, por meio do sequenciamento e análises filogenéticas. O presente estudo busca contribuir para o conhecimento da diversidade genética de agentes Bartonellaceae em flebotomíneos e auxiliar na elucidação de possíveis ciclos de transmissão entre dípteros e hospedeiros humanos e animais. (AU)