Estudo de tratamento oxidativo contra a persistência bacteriana induzida pelo estresse à antibiótico

Resumo

A persistência bacteriana, fenômeno pelo qual uma subpopulação de células entra em um estado de dormência metabólica tornando-se temporariamente tolerante à ação de antibióticos, permite que as bactérias persistentes sobrevivam em condições adversas, como o tratamento com antibióticos. O projeto tem como principal objetivo padronizar protocolos de Inativação Fotodinâmica (TFD) utilizando curcumina (fotossensibilizador) e luz (450 nm) para avaliar mudanças fenotípicas que contribuam para a redução da formação de bactérias persistentes. Considerando que a pressão seletiva exercida por subdosagens de antibióticos pode favorecer a sobrevivência de células que naturalmente entram em estado de dormência, aumentando sua proporção na população, é proposto também como um objetivo secundário do projeto avaliar a influência da TFD em população de bactérias persistentes diante de subdosagens de antibioticoterapia. Para isso, pretende-se avaliar os efeitos da TFD no perfil de persistência, tanto adquirida quanto intrínseca, de duas linhagens bacterianas da mesma espécie Staphylococcus aureus e isolado clínico de MRSA (Staphylococcus aureus resistente à meticilina). A avaliação das características fenotípicas de bactérias persistentes será realizada por meio da análise da capacidade de sobrevivência microbiana em condições adversas da presença de subdosagem de antibióticos utilizando: (1) testes de sensibilidade a antibióticos avaliando avaliados pela concentração mínima Inibitória (CMI); (2) ensaios de sobrevivência por curvas de morte; (3) análise de taxa de crescimento por meio do impacto da persistência na fase de latência; e (4) microscopia eletrônica de varredura (MEV) para avaliar as alterações morfológicas que acompanham a persistência, como tamanho celular, forma e presença de estruturas específicas. Portanto, a influência da TFD em bactérias persistentes poderá contribuir para informações valiosas para o desenvolvimento de terapias mais eficazes contra doenças infecciosas em falhas de antibiótico.