Descoberta de medicamentos contra doenças infecciosas virais humanas

Resumo

O Brasil é um dos países mais afetados por doenças parasitárias causadas por patógenos virais. Essas infecções afetam gravemente a saúde pública e o bem-estar em grande parte do mundo tropical. Os tratamentos medicamentosos existentes baseiam-se em substâncias ativas antigas e frequentemente muito tóxicas, e os relatos sobre o desenvolvimento de resistência de patógenos estão aumentando. A busca por novas entidades químicas com atividade antipatogenética e novos mecanismos de ação é, portanto, uma tarefa altamente urgente. A gripe causada por vírus influenza (tipos A, B, C e D) é uma infecção respiratória contagiosa distribuída mundialmente. A gripe possui uma ampla gama de hospedeiros, dependendo das cepas do vírus influenza A (IAV). Com base nas cepas circulantes do vírus influenza, uma miríade de hospedeiros foi descrita. A maioria das cepas de influenza evoluiexclusivamente no grande reservatório de aves aquáticas, mas algumas cepas aviárias altamente patogênicas (por exemplo, H5N1, H5N8 e H7N9) podem infectarhumanos com consequências letais (até 60% de mortalidade) e representam potenciais ameaças pandêmicas para a humanidade se desenvolverem transmissibilidade entre humanos. As proteínas HA e NA estão presentes na superfície mais externa do vírion e desempenham papéis cruciais naligação do vírus às células hospedeiras para iniciar o ciclo de infecção, levando à subsequente liberação da progênie viral. Osmedicamentos anti-influenza atualmente disponíveis têm como alvo principal a proteína NA. O IAV pode ser classificado em diferentes subtipos com base nas propriedades antigênicas das proteínas HA e NA. Até o momento, 16 subtipos de HA e 9 de NA foram relatados com base em suas variações de aminoácidos (Lynch e Walsh, 2007; Proença-Módena et al., 2007). A proteína HA determina a especificidade do hospedeiro para o IAV. As proteínas HA dos vírus da influenza aviária e humana se ligam a dois a três receptores de ácido siálico e a dois a três receptores de ácido siálico, respectivamente, enquanto a influenza suína se liga a ambos (Trebbien et al., 2011; Byrd-Leotis et al., 2017). Muitos dos subtipos de IAV, H5N1, H7N9 e H9N2, podem infectar aves e humanos (Mehle et al., 2019). No entanto, para que essas viroses aviárias (AV) se repliquem eficientemente em células de mamíferos, a adaptação da polimerase viral ao hospedeiro é necessária. A replicação do IAV é realizada pela RNA polimerase viral dependente de RNA, que funciona como um complexo heterotrimérico, formado pelos componentes separados PA, PB1 e PB2. Poucas mutações são necessárias para a adaptação de aves a humanos (Almond, 1977, Tarendeau et al., 2008, Mehle e Doudna, 2009), e várias delas se agrupam na superfície da seção C-terminal de 221 aminoácidos do PB2, compreendendo domínios separados "627" e "NLS" (Tarendeau et al., 2008, Tarendeau et al.,2007). Em particular, a mutação do resíduo 627 de E para K no avPB2 resgata a atividade da polimerase e a replicação viral em células de mamíferos.Neste projeto de TT4A, o foco será dado às proteínas PB2 e PB1 do H5N1 em termos de expressão recombinante e preparação para cristalização de proteínas.