Estudos clínico-moleculares em doenças genéticas humanas

Resumo

Cerca de 10% dos homens inférteis e estéreis que procuram ajuda em clínicas especializadas apresentando azoospermia ou oligospermia severa idiopática apresentam microdeleções na região do Yq11, onde se localizam os fatores controladores da espermatogênese, referido como fator de azoospermia (AZF, Azoospermia Factor). A análise destas deleções tem demonstrado que pelo menos três loci (AZFa, AZFb e o AZFc) em Yq11 são requeridos para desenvolvimento normal da espermatogênese. Entretanto, o completo entendimento do mecanismo pelo qual a região Yq11 1 atua no processo espermatogênico ainda não se encontra totalmente estabelecido, havendo necessidade de se avaliar um número maior de homens inférteis idiopáticos, na tentativa de detectar microdeleções que possam elucidar a relação existente entre as alterações genéticas envolvendo a região do gene AZF e as anormalidades espermatogênicas. Neste trabalho pretendemos realizar a análise molecular da região do gene AZF em uma amostra de homens inférteis e estéreis idiopáticos, na expectativa de se detectar microdeleções envolvendo este gene que possam auxiliar o mapeamento e um melhor esclarecimento dos genes responsáveis pela espermatogênese, além de oferecer aconselhamento genético adequado aos indivíduos que desejam realizar reprodução assistida pela técnica de FIV ou ICSI. As síndromes de Angelman (SA) e Prader-Willi (SPW) são patologias neurogenéticas consideradas como os principais exemplos das síndromes associadas ao "imprinting" genômico em seres humanos, além do grande interesse que elas apresentam devido à variabilidade de mecanismos genéticos envolvidos em sua determinação. No presente projeto, pretendemos realizar o estudo da estrutura do gene UBE3A nos casos que apresentarem herança biparental por ser este o gene responsável pela SA e, portanto, por serem as mutações de ponto nesse gene as responsáveis pelo quadro clínico nos pacientes com herança biparental. Assim, pretende-se determinar a causa genética do aparecimento desta síndrome nos casos de herança biparental, estabelecendo corretamente os riscos de recorrência nesses casos. Para o estudo do gene UBE3 A realizaremos das para mutações de ponto com o uso da técnica de SSCP e, após procederemos ao sequenciamento de DNA para o estudo e identificação das mutações. (AU)