Reação da polimerase em cadeia no diagnóstico precoce da leptospirose

Resumo

A leptospirose tem importância crescente em nosso meio, pela ocorrência de surtos epidêmicos e aumento da letalidade. Entre as dificuldades diagnosticas salientam-se a manifestações clínicas vagas nos 1ºs dias de doença; b. baixa sensibilidade de exames microbiológicos e da reação de referência (soroag. microscópica) no início da doença. Objetiva-se testar a sensibilidade de PCR aplicada a amostras de sangue e urina de pacientes, comparativamente à técnica IgM-Elisa, de maior sensibilidade, porém com dados insuficientes no início da doença. Para tal, serão utilizados oligonucleotídeos iniciadores G1/G2, segundo Gravekamp et al, 1993, que amplificam um fragmento de 285 pares de bases de leptospiras patogênicas, com sensibilidade de detecção de 1-10 leptospiras/ml e oligonucleotídeos iniciadores LP1/LP2, segundo Sun-Ho et al, 1994, que amplificam um fragmento de 274 pares de bases, com sensibilidade de detecção de 2 leptospiras. O estudo da especificidade na fase de validação será realizado mediante hibridização do produto amplificado de sorotipos de leptospiras mais prevalentes na cidade de São Paulo. (AU)