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(Referência obtida automaticamente do Web of Science, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores.)

Biophysical and biochemical studies of a major endoglucanase secreted by Xanthomonas campestris pv. campestris.

Texto completo
Autor(es):
Rosseto, Flavio Rodolfo ; Manzine, Livia Regina ; Neto, Mario de Oliveira ; Polikarpov, Igor
Número total de Autores: 4
Tipo de documento: Artigo Científico
Fonte: Enzyme and Microbial Technology; v. 91, p. 1-7, SEP 2016.
Citações Web of Science: 3
Resumo

Endoglucanases are the main cellulolytic enzymes secreted by the bacterium Xanthomonas campestris pv. campestris (Xcc). The major endoglucanase exported by this bacterium into an external milieu is an enzyme XccCel5A, which belongs to GH5 family subfamily 1 and is encoded by the gene engXCA. We purified XccCel5A using ammonium sulfate precipitation followed by size exclusion chromatography and identified it by zymogram analysis. Circular dichroism and fluorescence spectroscopy studies showed that XccCel5A is stable in a wide pH range and up to about 55 degrees C and denatures at the higher temperatures. The optimal conditions for enzyme activity were identified as T = 45 degrees C and pH = 7.0. Under the optimum conditions the catalytic efficiency (k(cat)/K-M) of the enzyme was determined as 5.16 x 10(4)s(-1) M-1 using carboxymethylcellulose (CMC) as a substrate. Our SAXS studies revealed extended tadpole-shape molecular assembly, typical for cellulases, and allowed to determine an overall shape of the enzyme and a relative position of the catalytic and cellulose binding domains. (C) 2016 Elsevier Inc. All rights reserved. (AU)

Processo FAPESP: 08/56255-9 - Structure and function of enzymes and auxiliary proteins from Trichoderma, active in cell-wall hydrolysis
Beneficiário:Igor Polikarpov
Linha de fomento: Auxílio à Pesquisa - Programa BIOEN - Temático
Processo FAPESP: 09/54035-4 - EMU: facility para estudos avançados de materiais nanoestruturados e biossistemas / FAMA
Beneficiário:Igor Polikarpov
Linha de fomento: Auxílio à Pesquisa - Programa Equipamentos Multiusuários
Processo FAPESP: 10/08370-3 - Estudos biofísicos e bioquímicos de exoglicanases do fungo Trichoderma harzianum envolvidas na biodegradação da celulose
Beneficiário:Wanius José Garcia da Silva
Linha de fomento: Auxílio à Pesquisa - Regular
Processo FAPESP: 10/16542-9 - Estudos de enzimas celulolíticas com potencial na transformação enzimática da biomassa de cana-de-açúcar utilizando Espalhamento de Raios-X a Baixo Ângulo
Beneficiário:Mario de Oliveira Neto
Linha de fomento: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado