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(Referência obtida automaticamente do Web of Science, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores.)

A Kinetic Characterization of the Gill (Na+, K+)-ATPase from the Semi-terrestrial Mangrove Crab Cardisoma guanhumi Latreille, 1825 (Decapoda, Brachyura)

Texto completo
Autor(es):
Farias, Daniel L. [1] ; Lucena, Malson N. [1] ; Garcon, Daniela P. [2] ; Mantelatto, Fernando L. [3] ; McNamara, John C. [3, 4] ; Leone, Francisco A. [1]
Número total de Autores: 6
Afiliação do(s) autor(es):
[1] Univ Sao Paulo, Dept Quim, Fac Filosofia Ciencias & Letras Ribeirao Preto, Ave Bandeirantes 3900, BR-14040901 Ribeirao Preto, SP - Brazil
[2] Univ Fed Triangulo Mineiro, DPG, Campus Univ Iturama, BR-38280000 Iturama, MG - Brazil
[3] Univ Sao Paulo, Dept Biol, Fac Filosofia Ciencias & Letras Ribeirao Preto, BR-14040901 Ribeirao Preto, SP - Brazil
[4] Ctr Biol Marinha, BR-11000600 Sao Sebastiao, SP - Brazil
Número total de Afiliações: 4
Tipo de documento: Artigo Científico
Fonte: Journal of Membrane Biology; v. 250, n. 5, p. 517-534, OCT 2017.
Citações Web of Science: 1
Resumo

We provide a kinetic characterization of (Na+, K+)-ATPase activity in a posterior gill microsomal fraction from the semi-terrestrial mangrove crab Cardisoma guanhumi. Sucrose density gradient centrifugation reveals two distinct membrane fractions showing considerable (Na+, K+)-ATPase activity, but also containing other microsomal ATPases. The (Na+, K+)-ATPase, notably immuno-localized to the apical region of the epithelial pillar cells, and throughout the pillar cell bodies, has an M (r) of around 110 kDa and hydrolyzes ATP with V (M) = 146.8 +/- 6.3 nmol Pi min(-1) mg protein(-1) and K (M) = 0.05 +/- 0.003 mmol L-1 obeying Michaelis-Menten kinetics. While stimulation by Na+ (V (M) = 139.4 +/- 6.9 nmol Pi min(-1) mg protein(-1), K (M) = 4.50 +/- 0.22 mmol L-1) also follows Michaelis-Menten kinetics, modulation of (Na+, K+)-ATPase activity by MgATP (V (M) = 136.8 +/- 6.5 nmol Pi min(-1) mg protein(-1), K (0.5) = 0.27 +/- 0.04 mmol L-1), K+ (V (M) = 140.2 +/- 7.0 nmol Pi min(-1) mg protein(-1), K (0.5) = 0.17 +/- 0.008 mmol L-1), and NH4 (+) (V (M) = 149.1 +/- 7.4 nmol Pi min(-1) mg protein(-1), K (0.5) = 0.60 +/- 0.03 mmol L-1) shows cooperative kinetics. Ouabain (K (I) = 52.0 +/- 2.6 A mu mol L-1) and orthovanadate (K (I) = 1.0 +/- 0.05 A mu mol L-1) inhibit total ATPase activity by around 75%. At low Mg2+ concentrations, ATP is an allosteric modulator of the enzyme. This is the first study to provide a kinetic characterization of the gill (Na+, K+)-ATPase in C. guanhumi, and will be useful in better comprehending the biochemical underpinnings of osmoregulatory ability in a semi-terrestrial mangrove crab. (AU)

Processo FAPESP: 13/00976-8 - Caracterização cinética e molecular da (Na+,K+)-ATPase do tecido branquial do caranguejo Cardisoma guanhumi (Latreille)
Beneficiário:Daniel Lima de Farias
Linha de fomento: Bolsas no Brasil - Doutorado
Processo FAPESP: 10/50188-8 - Crustáceos decápodes: multidisciplinaridade na caracterização da biodiversidade marinha do estado de São Paulo (taxonomia, espermiotaxonomia, biologia molecular e dinâmica populacional) (Biodiversidade Marinha)
Beneficiário:Fernando Luis Medina Mantelatto
Linha de fomento: Auxílio à Pesquisa - Programa BIOTA - Temático
Processo FAPESP: 13/24252-9 - O papel da (Na+,K+)-ATPase na capacidade osmorregulatória do caranguejo Ucides cordatus: uma abordagem bioquímica e molecular
Beneficiário:Malson Neilson de Lucena
Linha de fomento: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
Processo FAPESP: 13/22605-1 - Caracterização cinética e molecular da (Na+,K+)-ATPase do tecido branquial do caranguejo Cardisoma guanhumi (Latreille)
Beneficiário:Francisco de Assis Leone
Linha de fomento: Auxílio à Pesquisa - Regular
Processo FAPESP: 10/17534-0 - Papel da (Na,K)-ATPase na osmorregulação e excreção de amônio em crustáceos eurialinos: identificação e efeitos do FXYD2 na regulação da (Na,K)-ATPase branquial do siri Callinectes danae
Beneficiário:Francisco de Assis Leone
Linha de fomento: Auxílio à Pesquisa - Regular