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Investigation of Activated Mouse Olfactory Sensory Neurons via Combined Immunostaining and in situ Hybridization

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Autor(es):
de Andrade Carvalho, Vinicius Miessler ; Nakahara, Thiago Seike ; Papes, Fabio
Número total de Autores: 3
Tipo de documento: Artigo Científico
Fonte: JOVE-JOURNAL OF VISUALIZED EXPERIMENTS; v. N/A, n. 170, p. 16-pg., 2021-04-01.
Resumo

Animals rely on chemical communication to convey and perceive relevant environmental information, ranging from assessment of food quality to detection of available mating partners or threats. In mice, this task is executed primarily by the olfactory system and its underlying subsystems, including the main and accessory olfactory systems. Both have peripheral organs populated by sensory neurons expressing G-protein coupled receptors able to bind chemical cues that reach the nasal cavity. Even though the molecular characteristics of these receptors is well understood, little is known about their cognate specific ligands. The method described here combines in situ hybridization detection of olfactory or vomeronasal receptors with immunodetection of phosphorylated ribosomal protein S6 (pS6) - a marker of neuronal activation. This protocol was devised to identify neurons activated after a single event of exposure to purified or complex chemical stimuli detected by the olfactory organs. Importantly, this technique allows the investigation of neurons triggered in biologically relevant contexts. Ideally, this method should be used to probe the molecular biology of the olfactory system and to study olfactory behaviors. (AU)

Processo FAPESP: 12/01689-0 - Estudo molecular do epigenoma na regulação da expressão de genes de receptores olfativos em mamíferos
Beneficiário:Vinicius Miessler de Andrade Carvalho
Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado Direto
Processo FAPESP: 15/50371-0 - Mecanismos subjacentes ao efeito da experiência social sobre os níveis hormonais, sinalização sensorial e comportamento
Beneficiário:Fabio Papes
Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
Processo FAPESP: 09/00473-0 - Biologia molecular do sistema olfativo em mamíferos: estudo da detecção de odores e sua representação neural no cérebro
Beneficiário:Fabio Papes
Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Jovens Pesquisadores
Processo FAPESP: 14/25594-3 - Manipulação optogenética de circuitos olfatórios
Beneficiário:Vinicius Miessler de Andrade Carvalho
Modalidade de apoio: Bolsas no Exterior - Estágio de Pesquisa - Doutorado Direto
Processo FAPESP: 12/21786-0 - Determinação e análise de mapas olfatórios no cérebro
Beneficiário:Vinicius Miessler de Andrade Carvalho
Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado Direto
Processo FAPESP: 12/04026-1 - Caracterização Molecular e Funcional de receptores da classe OR expressos no Órgão Vomeronasal de mamíferos.
Beneficiário:Thiago Seike Picoreti Nakahara
Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado