Biochemical Characterization of a Novel Thermostable 1,4-α-Glucoamylase from Aspergillus brasiliensis Strain Isolated in the Brazilian Atlantic Forest

Autor(es)

Zaghetto de Almeida, Paula ; Alnoch, Robson Carlos ; Pinheiro, Vanessa Elisa ; Pereira Gimenez, Marita ; Polizeli, Maria de Lourdes Teixeira de Moraes

• Tipo de documento: Artigo Científico
• Fonte: Applied Biochemistry and Biotechnology; v. 196, n. 10, p. 20-pg., 2024-03-21.

Resumo

Glucoamylases are exo-enzymes that cleave the ends of the starch chain, releasing glucose units. In the current work, we described a novel 1,4-alpha-glucoamylase from an A. brasiliensis strain isolated from an environmental sample. The purified glucoamylase, GlaAb, has a molecular mass of 69 kDa and showed a starch binding domain. GlaAb showed a similar sequence to other fungal glucoamylases, and the molecular 3D model analysis of GlaAb suggests an overall structure as described in the literature, except by elongation in the loop connecting the 4th and 5th alpha-helices. The enzyme showed activity over a wide range of pH and temperature, with maximum activity at pH 4.5 and 60 degrees C. GlaAb was stable at 50 degrees C for 7 h, maintaining 67% residual activity, and it was not inhibited by glucose up to 0.1 M. The glucoamylase was 65% more active in the presence of Mn2+ and showed a Km of 2.21 mg mL(-1), Vmax of 155 U mg(-1), Kcat 179 s(-1), and Kcat/Km 81.06 mg mL(-1) s(-1) using potato starch as substrate. The results obtained are promising and provide the basis for the development of applications of GlaAb in the industrial process. (AU)

• Processo FAPESP: 13/01437-3 - Diversidade do potencial amilolítico em fungos filamentosos: purificação e caracterização de uma glucoamilase de Aspergillus brasiliensis
• Beneficiário: Paula Zaghetto de Almeida
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Processo FAPESP: 14/50884-5 - INCT 2014: Instituto Nacional de Ciência e Tecnologia do Bioetanol
• Beneficiário: Marcos Silveira Buckeridge
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Temático
• Processo FAPESP: 20/00081-4 - Desenvolvimento de estratégias para imobilização e co-imobilização de enzimas envolvidas na degradação de biomassa
• Beneficiário: Robson Carlos Alnoch
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Processo FAPESP: 18/07522-6 - Desenvolvimento de tecnologias ecológicas para a hidrólise de biomassa e resíduos da indústria de celulose e papel
• Beneficiário: Maria de Lourdes Teixeira de Moraes Polizeli
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Processo FAPESP: 23/09627-8 - Formulação de consórcios enzimáticos "tailor-made" para a degradação da parede celular de variedades de cana-de-açúcar
• Beneficiário: Robson Carlos Alnoch
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Programa Fixação de Jovens Doutores
• Processo FAPESP: 10/52322-3 - Bioprospecção de fungos filamentosos produtores de holoenzimas com aplicação em biorefinaria
• Beneficiário: Maria de Lourdes Teixeira de Moraes Polizeli
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Programa BIOTA - Regular
• Processo FAPESP: 23/01547-5 - Formulação de consórcios enzimáticos "tailor-made" para a degradação da parede celular de variedades de cana-de-açúcar
• Beneficiário: Maria de Lourdes Teixeira de Moraes Polizeli
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular