Expressão de subunidades P2X em células de Leydig de camundongos em diferentes idades e interações entre as subunidades P2X2, P2X4, P2X6 formadoras de receptores funcionais

Resumo

Nos últimos anos, o ATP tem sido alvo de vários estudos ligados à sinalização intercelular. Há evidências de que ele possa atuar tanto como mediador de eventos rápidos (neurotransmissão, por exemplo), como também em processos celulares de longo prazo, envolvendo mecanismos ligados à proteína G. A ação do ATP na membrana celular se dá por meio de receptores purinérgicos do tipo P2X (canais iônicos ativados por ligantes) e P2Y (receptores acoplados à proteína G). Até o momento, já foram identificados e clonados sete subunidades de receptores P2X (P2X1 - P2X7), que se agrupam em trímeros, tanto homoméricos quanto heteroméricos, para formação de receptores funcionais. Os receptores homoméricos P2X1-7 e heteroméricos P2X1/2, P2X1/4, P2X1/5, P2X2/3, P2X2/6, P2X4/6 e P2X4/7 apresentam características biofísicas e farmacológicas distintas. O influxo de cálcio pelos receptores purinérgicos justifica em parte o aumento da concentração de Ca2+ intracelular ([Ca2+]i) observado em algumas situações fisiológicas, o que evidencia ser esta uma importante via envolvida nas respostas mediadas desses receptores "in vivo". O tratamento de células de Leydig de ratos e camundongos com ATP, causa aumento na [Ca2+]i e na secreção de testosterona, reforçando a hipótese de que a sinalização via Ca2+ pode contribuir para o controle da secreção de testosterona nessas células. As células de Leydig de camundongos apresentam subunidades P2X2, P2X4, P2X6 e P2X7, porém a participação funcional de receptores P2X7 e P2X4/7 foi descartada. Além disso, há indícios da presença de heterômeros P2X2/4/6 que exibem perfil farmacológico dominante para a subunidade P2X2. Dessa forma, o presente estudo tem por objetivo observar as interações entre as subunidades de receptores purinérgicos P2X em células de Leydig de camundongos adultos, analisando propriedades moleculares e eletrofisiológicas desses receptores.