EFEITO DA IRRADIAÇÃO COM LASER DE BAIXA INTENSIDADE EM PRÉ-OSTEOBLASTOS IN VITRO: ANÁLISE DA VIABILIDADE CELULAR E EXPRESSÃO DAS MMPs 2 E 9.

Resumo

Os lasers de baixa intensidade são ondas eletromagnéticas constituídas por um feixe de fótons de mesma freqüência, com comprimentos de ondas específicos que atuam na biomodulação de células. Funcionam como um agente terapêutico reequilibrando e normalizando a atividade celular. Além disso, possuem propriedades analgésicas, antiinflamatórias e possível aceleração da cicatrização de feridas. Os osteoblastos são células do tecido ósseo capazes de produzir matriz mineralizada. Porém, há fatores envolvidos no processo de remodelação de matriz extracelular ainda não bem compreendidos, em especial na remodelação óssea e, dentre eles estão as metaloproteinases de matriz (MMPs). Em relação aos efeitos do laser em osteoblastos, os estudos têm mostrado resultados positivos no aumento da produção de fosfatase alcalina o que indica maior atividade celular. O objetivo deste trabalho é avaliar a influência da fototerapia com laser de baixa intensidade na viabilidade de pré-osteoblastos e atividade das MMPs in vitro. Serão plaqueadas 5x10²células da linhagem MC3T3 (pré-osteoblastos de camundongos ATCC) em placas de 96 poços, as quais serão irradiadas com laser vermelho (660nm) e infravermelho (780nm) nas doses de 3 e 5 J/cm², além de um grupo controle sem irradiação. Os pré-osteoblastos serão coletados e avaliados quanto à viabilidade celular (contagem de células, redução do MTT e captação do Vermelho Neutro) e a atividade de enzimas (MMPs 2 e 9) será avaliada por meio de zimografia. Após a preparação das proteínas dos pré-osteoblastos, as mesmas serão submetidas à zimografia. Os géis dos grupos controle e tratados serão escaneados utilizando-se o ImageScanner e analisados com o Kodak Molecular Imaging Software®. As análises estatísticas serão feitas através dos testes ANOVA, Kruskal-Wallis, e teste "t", de acordo com sua indicação (p<0,05).