Neuroplasticidade nos núcleos da base: papel do óxido nítrico na Doença de Parkinson e nas discinesias induzidas pela L-Dopa

Resumo

A L-3,4-dihidroxifenilalanina (L-DOPA), precursor da dopamina, é o tratamento sintomático mais efetivo da doença de Parkinson. Entretanto, sua administração prolongada provoca complicações motoras debilitantes como as discinesias. Recentemente demonstramos que inibidores de enzimas de síntese de óxido nítrico (NOS) atenuam as discinesias induzidas por L-DOPA sem comprometer os efeitos motores benéficos. O objetivo geral desse projeto é ampliar este estudo analisando os mecanismos celulares e moleculares que sublinham a ação do óxido nítrico (NO) nos processos neuroprotetores/neuroplásticos nas discinesias induzidas pela administração de L-DOPA em animais com Parkinsonismo induzido pela neurotoxina 6-hidroxidopamina (6-OHDA). Os objetivos específicos são (I) por meio do estudo do comportamento, determinar o efeito do tratamento crônico com o inibidor preferencial da NOS neuronal nas discinesias induzidas pela L-DOPA; (II) por meio da análise celular, estudar a mobilização de estruturas neurais que apresentam indução de marcador de atividade celular utilizando a expressão do gene Fos-B e da atividade NADPH-diaforase/NOS, analisando a co-marcação Fos-B e histoquímica para atividade NADPH-diaforase; (III) analisar a expressão das isoformas da NOS (neuronal, endotelial e induzida), da guanilato ciclase solúvel, da guanosina monofosfato cíclico , da proteína quinase sensível ao GMPc e determinar o estado de fosforilação da proteína DARPP-32 (fosfoproteína-32 regulada por adenosina monofosfato cíclico e dopamina) por western blot no estriado, a principal estrutura de processamento de informações dos núcleos da base; (IV) avaliar regiões cerebrais, considerando-se inicialmente expressão da proteína Fos-B em conjunto com a atividade NADPH-diaforase, candidatas a receber microinjecões de inibidor da NOS neuronal para análise do efeito da inibição local da atividade nitrérgica sobre o controle das discinesias. (AU)