Novos alvos terapêuticos: utilização de enzimas recombinantes para triagem de fármacos de interesse médico veterinário e humano.

Resumo

A clonagem de genes em vetores de expressão possibilita a produção de enzimas de organismos patogênicos em organismo heterólogo. Considerando organismos geneticamente modificados e não infectantes podemos produzir proteínas em larga escala. A produção de massa de proteínas possibilita desde a cristalização até testes avançados de triagem de novos fármacos. A enzima arginase é responsável pela conversão do aminoácido L-arginina em ornitina e uréia. Em Leishmania, a enzima arginase desempenha um papel crítico na produção de ornitina que é a molécula precursora de poliaminas (espermina, espermidina). A produção de poliaminas é essencial para o crescimento e multiplicação de Leishmania. O nocaute do gene da enzima arginase de Leishmania demonstrou que a enzima pode ser utilizada como alvo terapêutico. O gene da arginase de Leishmania (Leishmania) amazonensis foi clonado em vetor de expressão heterólogo e em seguida a enzima foi produzida e purificada em larga escala. Extratos vegetais de diversas espécies do Cerrado Tocantinense foram testados e apresentaram inibição da arginase de Leishmania. O sucesso da inibição da arginase in vitro naturalmente conduz aos ensaios de avaliação em culturas de promastigota e em culturas de amastigotas, além da avaliação do potencial terapêutico em modelo animal. Assim este projeto propõe isolar, caracterizar e testar inibidores seletivos de arginase de L. (L.) amazonensis em cultura e em modelo animal de infecção por Leishmania. Além das moléculas obtidas de vegetais também testaremos protótipos de inibidores sintéticos que foram planejados para inibirem a enzima arginase. (AU)