Efeitos da proteína K1 de diferentes genótipos do herpesvírus associado ao sarcoma de Kaposi / herpesvírus humano tipo 8 na expressão gênica de células endoteliais humanas in vitro

Resumo

O herpesvírus associado ao sarcoma de Kaposi / herpesvírus humano tipo 8 (KSHV/HHV-8) participa do desenvolvimento do sarcoma de Kaposi e de algumas doenças linfoproliferativas, notadamente em indivíduos imunocomprometidos. Embora o vírus seja encontrado em fase de latência na maior parte das células neoplásicas infectadas, alguns produtos virais de ciclo lítico também podem ter participação na patogênese dos cânceres associados ao KSHV/HHV-8. Dentre estes destaca-se a proteína K1, que interfere na transdução de sinais intracelulares, favorecendo a proliferação e sobrevivência da célula infectada pelo KSHV/HHV-8. K1 é codificada pela ORF-K1, que apresenta elevada variabilidade em relação aos outros segmentos do genoma do KSHV/HHV-8e é comumente empregada para a genotipagem viral . Até o momento não se sabe se os diferentes genótipos virais apresentam características biológicas distintas, com consequências no potencial cancerígeno do KSHV/HHV-8. Assim, o presente estudo visa verificar se células endoteliais humanas primárias expressando diferentes formas da proteína K1 do KSHV/HHV-8 apresentam mudanças na expressão de genes celulares críticos na carcinogênese e na biologia de células endoteliais. Vetores de expressão contendo a ORF-K1 de genótipos A, B e C do KSHV/HHV-8 serão transfectados em células endoteliais de cordão umbilical humano (HUVECs). Constatada a expressão de K1, as células serão submetidas a análise de expressão em nível transcricional de genes celulares selecionados empregando-se PCR quantitativa em tempo real. Os resultados serão analisados com vistas a se verificar eventuais modificações no fenótipo celular in vitro e na expressão dos genes celulares avaliados na dependência das diferentes formas de K1 expressas pelas células endoteliais transfectadas. (AU)