Efeito do tratamento com glicose e metilglioxal sobre a função de linfócitos humanos: possível papel protetor da astaxantina e da vitamina C

Resumo

A incidência crescente de diabetes mellitus (DM) constitui uma das principais ameaças à saúde humana. Alterações hormonais, consumo calórico excessivo, sedentarismo e obesidade, têm uma influência significativa na sua patogênese sendo, a disfunção celular e a resistência a insulina as marcas desta doença. Um evento muito importante na presença de hiperglicemia intracelular é a glicação de moléculas, formando os produtos finais de glicação (AGEs). Os efeitos patológicos dos AGEs estão relacionados à capacidade destes compostos de modificar as propriedades químicas e funcionais das mais diversas estruturas biológicas. Este trabalho tem por objetivo avaliar o efeito do tratamento com metilglioxal (30 µM) e glicose (20 mM), como indutores de AGEs e estresse oxidativo, em linfócitos do sangue periférico humano, bem como a possível atuação protetora da astaxantina e da vitamina C sobre os parâmetros funcionais destas células. As determinações a serem analisadas são: viabilidade celular por citometria de fluxo após tratamento das células com metilglioxal e glicose paralelamente ao tratamento com ASTA (2 µM) e vitamina C (100 µM); fragmentação do DNA e despolarização mitocondrial como parâmetros de morte celular; produção de interleucinas pró e antiinflamatórias pelo método de ELISA; avaliações da lipoperoxidação lipídica (ensaio de TBARS), dos danos oxidativos em proteínas (carbonilas protéicas e tióis); produção de EROs pela avaliação da produção de ânion superóxido; avaliação da concentração de nitritos/nitratos e de H2O2; relação GSH/GSSG; liberação intracelular de cálcio; determinação da capacidade proliferativa de linfócitos T e B estimulados com concanavalina A e LPS, respectivamente. Este estudo poderá contribuir para a compreensão do envolvimento dos AGEs na ação específica da ASTA e da vitamina C sobre as células do sistema imune. Além disso, futuramente poderemos sugerir a associação destes antioxidantes para o tratamento do diabetes tipo 2. (AU)