Estudo funcional do gene MAPK7, proposto como marcador prognóstico em osteossarcoma.

Resumo

Introdução: O osteossarcoma (OS) é um tumor ósseo maligno e entre os tumores ósseos é o que apresenta maior incidência em adolescentes. Ao diagnóstico, a presença de metástase é um fator decisivo. Dessa forma, o foco das pesquisas tem se voltado para um maior entendimento a respeito da biologia básica desse tumor. Em estudo anterior do nosso grupo, observamos que o aumento da expressão gênica de MAPK7 está fortemente associado aos parâmetros clínicos colaborando para uma pior resposta ao tratamento e, conseqüentemente, baixa sobrevida global dos pacientes. Com base nesses achados sugerimos que o gene MAPK7 possa ser um possível marcador prognóstico em OS e que as alterações nos níveis de expressão desta cinase envolvida em importantes vias de sinalização celular poderiam estar contribuindo para a agressividade e progressão do OS. Objetivo: Com base nos resultados obtidos, o objetivo desse trabalho será avaliar a função do gene MAPK7 em duas linhagens celulares de osteossarcoma (MG-63 e U2OS) utilizando técnicas que possam nos mostrar o papel desse gene em OS. Materiais e Métodos: Avaliaremos se o aumento de expressão é resultado de uma mutação no gene MAPK7 através do seqüenciamento gênico em amostras de fragmentos de OS e nas linhagens celulares. Utilizaremos o Silencer® Select Validated siRNA (Ambion) para o silenciamento do gene MAPK7 e posteriormente realizaremos técnicas de viabilidade, proliferação, apoptose, migração e invasão em células silenciadas e não silenciadas para que se possa elucidar o papel do gene MAPK7 como um possível marcador prognóstico em OS.