Estudo comparativo entre células estromais mesenquimais derivadas de pacientes com diabetes mellitus tipo 1 e de indivíduos saudáveis com relação ao potencial terapêutico no tratamento do diabetes experimental

Resumo

O diabetes mellitus do tipo 1 (DM-1) é uma doença autoimune caracterizada pela destruição seletiva de células ² pancreáticas produtoras de insulina. Existem diversas formas de tratamento do DM-1, tais como administração de insulina, imunossupressores, transplantes de pâncreas ou ilhotas pancreáticas, porém todos se mostram ineficientes em algum aspecto. Portanto, existe atualmente a necessidade do desenvolvimento de alternativas terapêuticas para o DM-1. As células estromais mesenquimais (MSCs) representam uma fonte de células-tronco ideal para terapias celulares em virtude de seu fácil isolamento, expansão e capacidades imunomoduladora e regenerativa. Ainda não está totalmente esclarecido na literatura se as MSCs derivadas de indivíduos com doenças autoimunes possuem alterações funcionais que podem estar relacionadas, de alguma forma, com a patogênese da doença. Apesar de alguns trabalhos mostrarem que a capacidade imunossupressora das MSCs derivadas de pacientes com doenças autoimunes está preservada in vitro, muitas questões acerca da biologia e dos mecanismos imunológicos e regenerativos utilizados por essas células in vivo ainda permanecem obscuros. Desse modo, esse projeto tem como objetivo avaliar a eficácia da infusão de MSCs derivadas de pacientes com diabetes mellitus tipo 1 (DM-1) no tratamento do diabetes experimental e comparar os resultados obtidos dessa terapia com o tratamento feito com MSCs isoladas de indivíduos saudáveis.Estudaremos a histopatologia dos camundongos diabéticos (indução por STZ) após o tratamento com MSCs, bem como os mecanismos imunológicos envolvidos na reposta clínica dos camundongos ao tratamento, a presença das MSCs infundidas no pâncreas dos animais e o papel das MSC na regeneração dos tecidos lesados pela agressão autoimune. Primeiramente, acompanharemos a resposta dos animais submetidos à terapia através do monitoramento da glicemia, peso corpóreo e níveis de insulina circulante. Com relação aos mecanismos imunológicos utilizados pelas MSCs na terapia ao DM-1, estudaremos uma possível modulação exercida pelas MSCs nas populações de células T reguladoras (Tregs), Th1 e Th17 tanto in vitro, quanto in vivo. Avaliaremos citocinas, moléculas de superfície e fatores de transcrição relacionados com a diferenciação e manutenção dessas populações celulares no baço, linfonodos pancreáticos e pâncreas. Investigaremos o hommig das MSCs transplantadas, com a finalidade de elucidar a dinâmica de distribuição dessas células frente a um microambiente de inflamação e/ou injúria tecidual. Por fim, estudaremos os mecanismos regenerativos utilizados pelas MSCs no reparo do pâncreas destruído pela agressão autoimune, através da marcação de moléculas relacionadas à neogênese de ilhotas pancreáticas e de proliferação/diferenciação celular. Após realização dos experimentos acima descritos, tanto com as MSCs derivadas de pacientes com DM-1, quanto com MSCs de indivíduos saudáveis, iremos comparar todos os resultados obtidos, para que possamos esclarecer se as células provenientes de indivíduos com DM-1 possuem defeitos funcionais (imunomodulação, regenerativos e de homming para o tecido lesado), possivelmente relacionados ao desencadeamento da autoimunidade e/ou progressão do DM-1. Desta forma, esse trabalho nos ajudará a compreender um pouco mais sobre a biologia e as características das MSCs de pacientes com DM-1, e que poderão ser estudadas detalhadamente e possibilitar, futuramente, o desenvolvimento de novas formas terapêuticas para o tratamento dessa doença.