Estudo dos transcriptomas de Pseudomonas aeruginosa, Acinetobacter baumannii e Klebsiella pneumoniae na elucidação dos seus mecanismos de resistência às polimixinas

Resumo

Pseudomonas aeruginosa, Acinetobacter spp. e Klebsiella pneumoniae são bacilos gram-negativos de significativa importância clínica, cuja resistência antimicrobiana tem aumentado durante as últimas décadas. As altas taxas de resistência aos carbapenens tem limitado as opções terapêuticas disponíveis, restringido às polimixinas como uma das únicas opções para o tratamento de infecções sérias causadas por esse tipo de patógeno. Entretanto, o aumento no uso das polimixinas tem favorecido o surgimento de resistência a esses antimicrobianos, entre bacilos gram-negativos. O mecanismo de resistência às polimixinas mais relatado é a modificação na composição do lipídio A do lipopolissacarídeo (LPS) da parede celular bacteriana, com adição de 4-amino-arabinose, impedindo a interação da droga com a membrana externa bacteriana, necessária para desempenhar seu mecanismo de ação. A expressão dos sistemas de regulação gênica PhoPQ e/ou PmrAB, que responde à estímulos ambientais, foram descritos como mediadores desse mecanismo de resistência em Gram-negativos, entretanto, o funcionamento desses sistemas regulatórios permanece sem total elucidação. Com este estudo pretendemos investigar o mecanismo adaptativo e adquirido de resistência às polimixinas em P. aeruginosa, A. baumannii e K. pneumoniae pela determinação e comparação dos transcriptomas, por pirosequenciamento em larga escala, de cepas representantes de P. aeruginosa, A. baumannii e K. pneumoniae, cultivadas na presença e ausência de polimixina B em meio de cultura com limitada concentração de Mg2+; sob limitada concentração de íons Ca2+; alta concentração de íons Fe3+ e em pH ácido, separadamente, e assim determinar o papel dos sistemas PhoPQ e PmrAB na resistência adaptativa às polimixinas, bem como identificar outros genes, e suas funções, que tem sua transcrição influenciada pelos sistemas PhoPQ e PmrAB em resposta a estímulos ambientais do meio. (AU)